MDA-MB-231細胞における細胞周期停止とミトコンドリアを介した内因性アポトーシス経路を調節することにより、ジオスメチンの抗増殖およびアポトーシス促進効果

背景乳がんは、世界で最も悪性腫瘍の1つです。天然のフラボノイドジオスメチンは、抗がん効果を含むさまざまな薬理学的活性を示すことが報告されています。この研究の目的は、MDA-MB-231細胞に対するジオスメチンの抗脳breast癌効果を調査し、細胞アポトーシスの根本的な分子メカニズムを探求することを目的としています。材料と方法MDA-MB-231細胞をジオスメチンと24時間インキュベートしました。次に、CCK-8およびLDHアッセイキットをそれぞれ使用して、細胞生存率と乳酸デヒドロゲナーゼ（LDH）漏れが検出されました。倒立蛍光顕微鏡とフローサイトメトリーを使用して、ミトコンドリア膜電位（MMP）および細胞内反応性酸素種（ROS）を測定しました。細胞アポトーシスと細胞周期は、フローサイトメトリーによって決定されました。アポトーシスと細胞周期関連遺伝子の発現は、ウエスタンブロッティングとQRT-PCRによって決定されました。結果結果は、細胞生存率の低下、細胞内ROS蓄積の増加とLDH放出の増加、およびG0/G1期の細胞周期停止によって示されるように、ジオスメチンがMDA-MB-231細胞に有意な細胞毒性効果を発揮し、ミトコンドリア機能不全とアポトーシス症を誘導することを明らかにしたことが明らかになりました。。さらに、ジオスメチン治療はBcl-2およびサイクリンD1の発現レベルを有意にダウンレギュレートし、p53、Bax、カスパーゼ3、カスパーゼ9、および切断カスパーゼ3の発現レベルを上方制御しました。細胞周期停止およびミトコンドリア媒介固有のアポトーシス経路を介したMDA-MB-231細胞に対するアポトーシス活性。我々の結果は、ジオスメチンの抗腫瘍メカニズムの理解を拡大し、ヒト乳がんの予防または治療のための活発な自然剤として使用できることを示唆しています。

BACKGROUND Breast cancer is one of the most malignant tumors worldwide. The natural flavonoid diosmetin has been reported to exhibit various pharmacological activities, including anti-cancer effects. This study aimed to investigate the anti-breast cancer effects of diosmetin on MDA-MB-231 cells and to explore the underlying molecular mechanisms of cell apoptosis. MATERIAL AND METHODS The MDA-MB-231 cells were incubated with diosmetin for 24 h. Then, cell viability and lactate dehydrogenase (LDH) leakage were detected using CCK-8 and LDH assay kits, respectively. Inverted fluorescence microscopy and flow cytometry were used to measure the mitochondrial membrane potential (MMP) and intracellular reactive oxygen species (ROS). Cell apoptosis and cell cycle were determined by flow cytometry. The expressions of apoptosis and cell cycle-related genes were determined by Western blotting and qRT-PCR. RESULTS The results revealed that diosmetin exerts significant cytotoxic effects on MDA-MB-231 cells, as indicated by decreased cell viability, increased intracellular ROS accumulation and LDH release, as well as cell cycle arrest in G0/G1 phase, inducing mitochondrial dysfunction and apoptosis. Moreover, diosmetin treatment significantly downregulated the expression levels of Bcl-2 and Cyclin D1, and upregulated that of p53, Bax, caspase 3, cleaved caspase 9, and cleaved caspase 3. CONCLUSIONS These findings demonstrate that diosmetin has anti-proliferative and pro-apoptotic activities against MDA-MB-231 cells via cell cycle arrest and the mitochondria-mediated intrinsic apoptotic pathway. Our results extend the understanding of the anti-tumor mechanism of diosmetin and suggest that it may be of use as an active natural agent for the prevention or treatment of human breast cancer.