ADAM10を介した細胞自動FLT3Lの脱落は、マウス脾臓の従来の樹状細胞の発達を媒介します

従来の樹状細胞（CDC）は、骨髄組織で末端に分化するために発達プログラムのカスケードを受ける骨髄（BM）前駆体に由来します。それぞれにBMでプレCDC1とプレCDC2Sのコミットは、それぞれCD8α+/CD103+ CDC1とCD11B+ CDC2にそれぞれに分化します。両方のCDCは開発中にサイトカインFLT3Lに依存していますが、FLT3LへのCDCのアクセシビリティを確実に保証するメカニズムはまだ解明されていません。ここでは、DCS（ITGAX-CRE×ADAM10-FL/FL;ADAM10ΔDC）でディス酸塩およびメタロプロテイナーゼ（ADAM）10を欠いているマウスを生成し、ADAM10の欠失が脾臓CDC2の発達に著しく影響を与えることを発見しました。脾臓に蓄積されたPRE-CDC2Sは、末期の分化CDC2として生存する突然の失敗を区別できないことを反映したトランスクリプトームの変化を伴って蓄積しました。誘導されたADAM10アブレーションは、末端に分化したCDC2Sの減少と、ADAM10の下流の主要な経路であるNotchシグナル伝達の回復をもたらしました。ADAM10ΔDCBMは、ADAM10が吸収したBMを伴うまたは伴わないBMキメラマウスでCDC2を生成できず、CDC2開発には細胞自律ADAM10が必要であることを示しています。Adam10ΔDCマウスのCDC2表面上の血清FLT3L濃度の低下と膜結合FLT3Lの保持、およびex Vivo培養超高出生におけるCDC2によるCDC2による溶融FLT3Lの放出を実証することにより、CDC2Sが可溶性FLT3Lの源であると判断しました。マウス胚性線維芽細胞を利用したin vitro研究を通じて、FLT3LはADAM10の基質であると判断しました。これらのデータは、CDC2をFLT3Lソースとして集合的に明らかにし、CDC2の開発と生存のためのFLT3Lアクセシビリティを高める可能性のある細胞自動メカニズムを強調しています。

Conventional dendritic cells (cDCs) derive from bone marrow (BM) precursors that undergo cascades of developmental programs to terminally differentiate in peripheral tissues. Pre-cDC1s and pre-cDC2s commit in the BM to each differentiate into CD8α+/CD103+ cDC1s and CD11b+ cDC2s, respectively. Although both cDCs rely on the cytokine FLT3L during development, mechanisms that ensure cDC accessibility to FLT3L have yet to be elucidated. Here, we generated mice that lacked a disintegrin and metalloproteinase (ADAM) 10 in DCs (Itgax-cre × Adam10-fl/fl; ADAM10∆DC) and found that ADAM10 deletion markedly impacted splenic cDC2 development. Pre-cDC2s accumulated in the spleen with transcriptomic alterations that reflected their inability to differentiate and exhibited abrupt failure to survive as terminally differentiated cDC2s. Induced ADAM10 ablation also led to the reduction of terminally differentiated cDC2s, and restoration of Notch signaling, a major pathway downstream of ADAM10, only modestly rescued them. ADAM10∆DC BM failed to generate cDC2s in BM chimeric mice with or without cotransferred ADAM10-sufficient BM, indicating that cDC2 development required cell-autonomous ADAM10. We determined cDC2s to be sources of soluble FLT3L, as supported by decreased serum FLT3L concentration and the retention of membrane-bound FLT3L on cDC2 surfaces in ADAM10∆DC mice, and by demonstrating the release of soluble FLT3L by cDC2 in ex vivo culture supernatants. Through in vitro studies utilizing murine embryonic fibroblasts, we determined FLT3L to be a substrate for ADAM10. These data collectively reveal cDC2s as FLT3L sources and highlight a cell-autonomous mechanism that may enhance FLT3L accessibility for cDC2 development and survival.