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Cold Spring Harbor protocols2019Jul01Vol.2019issue(7)

エレクトロポレーションによるDNAトランスフェクション

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文献タイプ:
  • Journal Article
概要
Abstract

パルス電界を使用するエレクトロポレーションは、さまざまな動物細胞、植物細胞、細菌にDNAを導入するために使用できます。エレクトロポレーションは、リポフィクションやリン酸カルシウム-DNA共沈着など、他のトランスフェクション技術に抵抗性のある細胞株とうまく機能します。しかし、他のトランスフェクション方法と同様に、テストされていない細胞株にエレクトロポアをするための最適な条件を経験的に決定する必要があります。いくつかの異なるエレクトロポレーション機器が商業的に利用可能であり、メーカーは特定の細胞タイプと他のものと最適化するためのガイドラインで使用するための詳細なプロトコルを提供しています。この方法では、遺伝子パルサーXCELLエレクトロポレーションシステム(Bio-Rad)を使用して、哺乳類細胞株を電気削減する条件を説明しています。

パルス電界を使用するエレクトロポレーションは、さまざまな動物細胞、植物細胞、細菌にDNAを導入するために使用できます。エレクトロポレーションは、リポフィクションやリン酸カルシウム-DNA共沈着など、他のトランスフェクション技術に抵抗性のある細胞株とうまく機能します。しかし、他のトランスフェクション方法と同様に、テストされていない細胞株にエレクトロポアをするための最適な条件を経験的に決定する必要があります。いくつかの異なるエレクトロポレーション機器が商業的に利用可能であり、メーカーは特定の細胞タイプと他のものと最適化するためのガイドラインで使用するための詳細なプロトコルを提供しています。この方法では、遺伝子パルサーXCELLエレクトロポレーションシステム(Bio-Rad)を使用して、哺乳類細胞株を電気削減する条件を説明しています。

Electroporation, which uses pulsed electrical fields, can be used to introduce DNA into a variety of animal cells, plant cells, and bacteria. Electroporation works well with cell lines that are refractory to other transfection techniques, such as lipofection and calcium phosphate-DNA coprecipitation. But, as with other transfection methods, the optimal conditions for electroporating DNA into untested cell lines must be determined empirically. Several different electroporation instruments are available commercially, and manufacturers supply detailed protocols for their use with specific cell types and guidelines for optimization with others. This method describes the conditions for electroporating mammalian cell lines using the Gene Pulser Xcell Electroporation System (Bio-Rad).

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