Proteus mirabilis Bacteriophageの分離と精製

細菌のさまざまな株を特異的に標的とするバクテリオファージは、適切に修正された濃縮技術を使用して、都市の下水から分離できます。この章では、Proteus mirabilis特異的バクテリオファージの分離のための詳細なプロトコルを提供します。簡単に言えば、予備的な下水は、標的ひずみを含む二重濃縮トリプティック大豆ブロスと混合され、インキュベートされます。その後、懸濁液はファージ栄養寒天に広がり、必要に応じて、細菌の成長とファージの増殖の誘導のために、群れの運動性阻害剤を補充します。細菌に感染するファージは、コンフルエントな細菌の芝生のプラーク（死んだ細菌のパッチ）によって識別されます。純粋なファージの調製は、2層の寒天プレートから単一のプラークを切り取り、その後のウイルス伝播を特定のP. mirabilis株で5回切り取ることによって得られます。

Bacteriophages specifically targeting different strains of bacteria can be isolated from urban sewage using properly modified enrichment techniques. This chapter provides a detailed protocol for isolation of Proteus mirabilis-specific bacteriophages. Briefly, prefiltered sewage is mixed with double-concentrated tryptic soy broth containing the target strain and incubated. Subsequently, the suspension is spread on phage nutrient agar, and if needed, supplemented with swarming motility inhibitor, for the induction of bacterial growth and phage multiplication. Phages infecting bacteria are identified by plaques (patches of dead bacteria) in the confluent bacterial lawn. A pure phage preparation is obtained by cutting out a single plaque from a double-layer agar plate and subsequent virus propagation five times on a given P. mirabilis strain.