3 'オーバーハングを持つ三脚RNAは、リグIを介した自然免疫応答を防ぎます

RNA干渉（RNAI）は、高い特異性を備えた強力な標的遺伝子ノックダウンを簡単に達成するため、ライフサイエンスの研究と治療の発達に大きな可能性を提供します。2ヌクレオチド（NT）3 'オーバーハングを含む19 bp二本鎖RNA（dsRNA）として知られる従来の小さな干渉RNA（siRNA）構造は、哺乳類細胞のRNAiをうまく誘導するために導入されているため、さまざまな構造変異体であるRNAiのトリガーが開発されました。私たちのグループは、以前にRNAIを誘導するRNA構造を標的とするマルチゲンとして分岐した三極干渉RNA（TIRNA）構造を報告しました。ただし、分岐したティルナ構造の免疫刺激効果は徹底的に評価されていません。この研究では、鈍い端を持つティルナは、よく知られている細胞質DsRNAセンサーであるレチノイン酸誘導性遺伝子I（RIG-I）に依存するT98G細胞およびマウスマクロファージ細胞の自然免疫応答をトリガーすることを示しています。興味深いことに、ティルナによってトリガーされる免疫応答は、2-NT 3 'オーバーハング構造の導入によって抑制されます。私たちの発見は、RIG-Iリガンドの構造的多様性を拡大し、治療用途のための安全なマルチフィルゲットRNA構造を開発するためのガイドを提供します。

RNA interference (RNAi) offers great promise in life science research and therapeutic development, as it easily achieves a potent target gene knockdown with high specificity. Since the conventional small interfering RNA (siRNA) structure, known as 19 bp double-stranded RNA (dsRNA) with 2-nucleotide (nt) 3' overhang, has been introduced to successfully elicit the RNAi in mammalian cells, a variety of structural variants of RNAi trigger have been developed. Our group previously reported branched, tripodal interfering RNA (tiRNA) structures as a multigene targeting RNA structure inducing RNAi. However, the immune stimulatory effect of branched tiRNA structure has not been thoroughly evaluated. In this study, we show that tiRNA with blunt ends triggers innate immune response in T98G cell and mouse macrophage cells, which is dependent upon the retinoic acid-inducible gene I (RIG-I), a well-known cytoplasmic dsRNA sensor. Interestingly, immune response triggered by tiRNA can be suppressed by the introduction of 2-nt 3' overhang structure. Our finding expands the structural diversity of RIG-I ligands and provides a guide to develop a safe multitargeting RNA structure for therapeutic application.