マウス血漿における変異IDH1/2阻害剤（エナシデニブ、イボシデニブおよびボラシデンブ）の同時定量化のための検証されたHPLC法：薬物動態研究への応用

アイソシトレートデヒドロゲナーゼ（IDH）阻害剤は、IDH1/2に変異を有する急性骨髄性白血病患者を治療するために承認された抗がん剤の新規クラスを含む。IDH阻害剤の同時定量、すなわちエナシデニブ（EDB）、イボシデニブ（IDB）およびボラシデニブ（VDB）の同時定量のための高性能液体クロマトグラフィー（HPLC）法の開発と検証を報告し、米国の食品および米国の食品およびボラシデニブ（VDB）医薬品局の規制ガイドライン。この方法には、単純なタンパク質沈殿プロセスを使用して、マウス血漿（100μL）からの内部標準（IS;フェナセチン）とともにEDB、IDB、およびVDBの抽出が含まれます。クロマトグラフィー分析は、勾配移動相（流れ勾配中の10 mM酢酸アンモニウムとアセトニトリルを含む）とX-Terraフェニルカラムを使用してHPLCシステムで実行されました。UV検出波の長さは、λmax265 nmに設定されました。EDB、IDB、VDBおよびTheは、それぞれ7.36、8.60、9.50、および5.12分で溶出され、合計実行時間は10分です。キャリブレーション曲線は、EDBで0.20-12.5μg/ml、IDBおよびVDBで0.50-12.5μg/mlの濃度範囲で線形でした（すべての分析対象者ではR2 =≥0.998）。検証結果は、受け入れ基準を満たしました。検証済みのHPLCメソッドは、マウスの薬物動態研究に正常に適用されました。

Isocitrate dehydrogenase (IDH) inhibitors comprise a novel class of anticancer drugs, which are approved to treat acute myeloid leukemia patients having mutations on IDH1/2. We report the development and validation of a high-performance liquid chromatography (HPLC) method for the simultaneous quantitation of IDH inhibitors, namely enasidenib (EDB), ivosidenib (IDB) and vorasidenib (VDB), in mouse plasma as per the US Food and Drug Administration regulatory guidelines. The method involves extraction of EDB, IDB and VDB along with internal standard (IS; phenacetin) from mouse plasma (100 μl) using a simple protein precipitation process. The chromatographic analysis was performed on an HPLC system using a gradient mobile phase (comprising 10 mm ammonium acetate and acetonitrile in a flow-gradient) and an X-Terra Phenyl column. The UV detection wave length was set at λmax 265 nm. EDB, IDB, VDB and the IS eluted at 7.36, 8.60, 9.50 and 5.12 min, respectively, with a total run time of 10 min. The calibration curve was linear over a concentration range of 0.20-12.5 μg/ml for EDB and 0.50-12.5 μg/ml for IDB and VDB (r2  = ≥0.998 for all of the analytes). Validation results met the acceptance criteria. The validated HPLC method was successfully applied to a pharmacokinetic study in mice.