プウマラウイルスの検出における診断使用のためのリアルタイムRT-PCRの評価

プウマラウイルス（PUUV）は、ヨーロッパでのハンタウイルス感染の最も一般的な原因であり、特に北、中央、東ヨーロッパ、ロシアで何千もの症例が発生しています。それは、軽度から重度までの臨床像を伴う腎症（NE）としても知られる腎症候群とともに、軽度の形態の出血性発熱を引き起こします。現在、NEの検査室診断は主に血清学に基づいています。ここでは、PUUV感染が疑われる患者から238の連続した診断血清サンプルを伴うPUUVを検出するために、リアルタイムのワンステップQRT-PCR（PUUV-QRT-PCR）を評価しました。PUUV-QRT-PCRは、PUUV RNAに対して特異的で敏感でした。分析感度（検出限界）は、反応ごとにPuuvの4コピーと推定されました。30（93％）のうち28（93％）Puuv IgM陽性サンプルもPuuv RNAに対しても陽性でした。誤検知は検出されなかったため、特異性は100％でした。興味深いことに、後続のIgMおよびIgGセロコンバージョンの前に、PUUV-QRT-PCRで1つのサンプルが陽性であることがわかりました。PUUV-QRT-PCRは、NE感染の初期段階での診断に使用でき、特に患者の状態が急速に悪化する可能性のあるまれな深刻な症例では役立つ可能性があります。

Puumala virus (PUUV) is the most common cause of hantavirus infection in Europe, with thousands of cases occurring particularly in Northern, Central and Eastern Europe and Russia. It causes a mild form of hemorrhagic fever with renal syndrome also known as nephropathia epidemica (NE) with clinical picture ranging from mild to severe. Currently, the laboratory diagnosis of NE is mainly based on serology. Here, we evaluated a real-time one-step qRT-PCR (PUUV-qRT-PCR) for detection of PUUV with 238 consecutive diagnostic serum samples from patients with suspected PUUV infection. The PUUV-qRT-PCR was both specific and sensitive for PUUV RNA. The analytical sensitivity (limit of detection) was estimated to be four copies of PUUV per reaction. Altogether 28 out of 30 (93%) PUUV IgM positive samples were positive also for PUUV RNA. No false positives were detected and the specificity was thus 100%. Interestingly, one sample was found positive in PUUV-qRT-PCR prior to subsequent IgM and IgG seroconversion. PUUV-qRT-PCR could be used for diagnostics in the early phase of NE infection and might be helpful especially in the rare severe cases when the patient's condition may deteriorate rapidly.