アモトサレンと紫外線で処理された血小板の凍結保存後の止血の反応性と生体反応修飾子の放出

背景：汚染性病原体の複製のリスクがあるため、血小板は5日間の貯蔵時間が制限されており、病原体の不活性化技術を使用することで7日間に延長できます。凍結保存（CP）は、より長い保管期間を可能にし、可用性の向上を可能にする代替手段である可能性があります。ただし、血小板の調製により、生物学的反応修飾子（BRM）の分泌が生じる可能性があり、レシピエントに不利な輸血反応を引き起こす可能性があります。CPが血小板機能に与える影響と、未処理（従来の）および病原体不活性化（PI）血小板濃縮物におけるBRMの放出を調査しました。 材料と方法：12個のバフィーコート由来の血小板ユニットは、アモトサレンと紫外線で病原体を不活性化するための光で処理しました。12の未処理ユニットがコントロールとして使用されました。24ユニットは凍結保存され、CPの前後にin vitro変数が分析されました。調査されたin vitro変数には、フローサイトメトリーによる血小板表面受容体と活性化マーカー、およびヴィスココラストグラフィによる凝固時間が含まれていました。サイトカインを含むBRMのパネルが調査されました。 結果：従来の血小板とPI血小板の両方のCPは、従来およびPI血小板濃縮物のCPの後、ほとんどのBRMの同様の増加とともにBRMの大幅な増加をもたらしました。一部のBRMの増加は、凝固時間の短縮、p-セレクチン発現の増加、ミトコンドリア膜貫通ポテンシャルの減少、およびADPおよびコラーゲンによる刺激に反応する能力の低下と有意に相関しました。 議論：従来の血小板とPI血小板の両方の凍結保存により、BRMの分泌が生じます。BRMの一部の増加は、血小板関数変数の変化と相関しており、BRMの放出は、血小板関数変数の変化と同様に、CPによって同様の方法で影響を受けることを示唆しています。Amotosalenおよび紫外線を使用したPiは、CPと組み合わせた光をCPだけでは免疫調節因子の放出に影響しませんでした。

BACKGROUND: Due to the risk of replication of contaminating pathogens, platelets have a limited storage time of 5 days, which can be prolonged to 7 days by the use of pathogen inactivation technologies. Cryopreservation (CP) may be an alternative to permit longer storage periods and increased availability. However, the preparation of platelets can result in secretion of biological response modifiers (BRM), which can cause adverse transfusion reactions in the recipient. We investigated the impact of CP on platelet function and release of BRM in untreated (conventional) and pathogen-inactivated (PI) platelet concentrates. MATERIALS AND METHODS: Twelve buffy coat-derived platelet units were treated with amotosalen and ultraviolet A light to inactivate pathogens. Twelve untreated units were used as controls. The 24 units were cryopreserved and in vitro variables were analysed before and after CP. The in vitro variables investigated included platelet surface receptors and activation markers by flow cytometry, and coagulation time by viscoelastography. A panel of BRM, including cytokines, was investigated. RESULTS: CP of both conventional and PI platelets resulted in a significant increase of BRM with similar increases of most of the BRM after CP of conventional and PI platelet concentrates. The increase in some of the BRM correlated significantly with shortened coagulation time, increased P-selectin expression, reduced mitochondrial transmembrane potential, and reduced capacity to respond to stimulation with ADP and collagen. DISCUSSION: Cryopreservation of both conventional and PI platelets results in secretion of BRM. The increase in some of the BRM correlated with changes in platelet function variables and suggests that BRM release is affected, in part, in a similar way by CP as are changes in platelet function variables. PI with amotosalen and ultraviolet A light in combination with CP did not affect the release of immunomodulatory factors more than CP alone did.