ポリフェノールエピガロカテキン腹劇（EGCG）を使用して抗生物質アズトレオナムの活性を回復し、緑膿菌の多剤耐性臨床分離株に対して復元します

導入。Pseudomonas aeruginosaは、本質的に多剤耐性（MDR）であり、頻繁に医療関連の発生に関連する重要なグラム陰性病原体です。抗生物質に対する耐性が高まり、開発中の新規薬物がほとんどないため、臨床医はしばしば重症患者を治療するために組み合わせを使用します。この研究の目的は、緑膿菌の臨床MDR株に対するアズトレオナムの活性を回復するエピガロカテキン（EGCG）の能力を評価することでした。チェッカーボードとタイムキルの速度論的アッセイを実施してin vitroでの相乗効果を評価し、in vivoでの併用の有効性をテストするために、感染のガレリアメロネラモデルを使用しました。蓄積アッセイを実行して、作用のメカニズムについて洞察を得ました。結果は、アズトレオナムとEGCG間の相乗効果が存在することを示しています[分数阻害濃度指数（FICIS）0.02-0.5]。併用により大幅に（P = <0.05）細菌殺害の増強が得られ、24時間でコロニーフォーミング単位ML-1の3 log10が減少します。EGCGは、アズトレオナムに対する感受性を、欧州抗菌薬感受性検査のために欧州委員会が設定したブレークポイントに等しいレベルに回復することができました。G. Mellonellaでは、この組み合わせは単剤療法よりも優れており、幼虫の生存率が増加した（94％対63％）。また、ヒトケラチノサイトおよびG.メロネラ幼虫に対するEGCGの比較的低い毒性を実証しました。蓄積アッセイデータは、相乗効果のメカニズムがAztreonam.conclusionの取り込みを増加させることによる可能性があることを示唆しています。EGCGは、MDR P. aeruginosaに対するAztreonamの活動を回復することができました。提示されたデータは、Aztreonam-EGCGの組み合わせのさらなる評価をサポートし、臨床医学での使用の可能性を強調しています。

Introductio n. Pseudomonas aeruginosa is an important Gram-negative pathogen that is intrinsically multidrug-resistant (MDR) and frequently associated with healthcare-associated outbreaks. With increasing resistance to antibiotics and with very few novel drugs under development, clinicians often use combinations to treat critically ill patients.Aim. The aim of this study was to evaluate the ability of epigallocatechin (EGCG) to restore the activity of aztreonam against clinical MDR strains of P. aeruginosa.Methodology. Checkerboard and time-kill kinetic assays were performed to assess synergy in vitro and the Galleria mellonella model of infection was used to test the efficacy of the combination in vivo. Accumulation assays were performed to gain insight into the mechanism of action.Results. The results demonstrate that synergy between aztreonam and EGCG exists [fractional inhibitory concentration indices (FICIs) 0.02-0.5], with the combination affording significantly (P=<0.05) enhanced bacterial killing, with a >3 log10 reduction in colony-forming units ml-1 at 24 h. EGCG was able to restore susceptibility to aztreonam to a level equal to or below the breakpoint set by the European Committee for Antimicrobial Susceptibility Testing. In G. mellonella, the combination was superior to monotherapy, with increased larval survival observed (94 % vs ≤63 %). We also demonstrated the relatively low toxicity of EGCG to human keratinocytes and G. mellonella larvae. Accumulation assay data suggest that the mechanism of synergy may be due to EGCG increasing the uptake of aztreonam.Conclusion. EGCG was able to restore the activity of aztreonam against MDR P. aeruginosa. The data presented support further evaluation of the aztreonam-EGCG combination and highlight its potential for use in clinical medicine.