成人発症免疫不全における抗インターフェロン-γ自己抗体の中和活性は、それらの結合ドメインに関連付けられています

抗インターフェロン-γ（IFN-γ）自己抗体（AutoABS）を使用した成人発症免疫不全（AOID）は、アジア諸国の新興免疫不全症候群です。中和抗IFN-γAutoABの存在は、重度の播種性日和見感染と有意に関連しています。しかし、患者の中和抗体の特性はあまり定義されていません。日和見感染症の患者における抗IFN-γAutoabsの特性をよりよく理解するために、単純化された競争結合ELISAが開発されました。抗IFN-γAutoABによって認識されたドメインは、市販のマウス抗IFN-γモノクローナル抗体（MAB）との競合に基づいて評価されました。第一に、これらのMABの結合親和性と中和能力（クローンB27、B133.5、およびMD-1）が特徴付けられました。生体層干渉測定を使用した運動分析とエピトープビニングは、これらのmAbの完全な長さのIFN-γおよび隣接する結合領域に匹敵する結合親和性を示しました。これらのmAbは、合成20-merペプチドを認識せず、IFN-γ媒介機能を異なる方法で阻害しました。競合結合ELISAでは、AOID血清中の抗IFN-γAutoABはB27、B133.5、およびMD-1 MAB結合をブロックしました。この証拠は、中和マウスの抗IFN-γMABと競合した自動abが、これらのmABとしてホモダイマーIFN-γの不連続なエピトープを認識したことを示唆しています。B27エピトープを認識した患者の自動ABは、機能分析によって決定される強力な中和活性を示しました。我々の結果は、AOID患者のIFN-γに対する自動ABの不均一性と、個人間の異なるパターンを実証しました。これらのデータは、AOID患者における抗IFN-γAutoABを中和するという基本的な知識を拡大します。

Adult-onset immunodeficiency (AOID) with anti-interferon-γ (IFN-γ) autoantibodies (autoAbs) is an emerging immunodeficiency syndrome in Asian countries. The presence of neutralizing anti-IFN-γ autoAbs are significantly associated with severe disseminated opportunistic infections. However, the characteristics of the neutralizing antibodies in patients are poorly defined. To better understand the properties of the anti-IFN-γ autoAbs in patients with opportunistic infections, a simplified competitive-binding ELISA was developed. The domains recognized by anti-IFN-γ autoAbs were assessed based on their competition with commercial neutralizing mouse anti-IFN-γ monoclonal antibodies (mAbs). First, the binding affinity and neutralizing capacity of these mAbs (clones B27, B133.5, and MD-1) were characterized. Kinetic analysis and epitope binning using bio-layer interferometry showed the comparable binding affinity of these mAbs to full-length IFN-γ and to the adjacent binding region. These mAbs did not recognize the synthetic 20-mer peptides and inhibited IFN-γ-mediated functions differently. In a competitive-binding ELISA, the anti-IFN-γ autoAbs in AOID serum blocked B27, B133.5, and MD-1 mAb binding. This evidence suggested that the autoAbs that competed with neutralizing mouse anti-IFN-γ mAbs recognized a discontinuous epitope of homodimeric IFN-γ as these mAbs. The patient autoAbs that recognized the B27 epitope exhibited strong neutralizing activity that was determined by the functional analysis. Our results demonstrated the heterogeneity of the autoAbs against IFN-γ in AOID patients and the different patterns among individuals. These data expand upon the fundamental knowledge of neutralizing anti-IFN-γ autoAbs in AOID patients.