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背景：猫では、腫瘍性と反応性リンパ球の増殖の分化は困難な場合があります。抗原受容体再編成（PARR）のPCRは、リンパ系集団のクローン性を評価するための有用な診断ツールです。以前のネコパール研究では、完全な免疫グロブリン重鎖V-D-J（IGI-VDJ）およびT細胞受容体ガンマ（TRG）遺伝子再編成のクローン性を評価しました。 目的：完全なIGH-VDJおよびTRG再配置、および不完全なIGH-DJ、Kappa削除要素（KDE）、および免疫グロブリンラムダライトチェーン（IGL）遺伝子再配置をターゲットにしたネコPARRプライマーの感度と特異性を、定義された免疫グロブリンラムダライトチェーン（IGL）遺伝子再配置を評価することを目指しました。ネコの新生物と非腫瘍コントロール。 方法：蛍光標識されたPCRプライマーは、完全なIGH-VDJ、不完全なIGH-DJ、KDE、IGL、およびTRG遺伝子再配置を2つの多重化PCR反応で増幅するように設計され、Fragment分析によりPCR産物を分析しました。12フローの細胞測定的に確認されたB細胞リンパ腫、26の細胞学的に確認されたB細胞起源の26の細胞学的に確認された胃リンパ腫の新鮮な組織サンプル、30個のフロー細胞測定で確認されたT細胞白血病、11個の陰性対照猫がテストされました。 結果：4つの免疫グロブリンプライマーセット（IGH-VDJ、IGH-DJ、KDE、およびIgL）を使用して、クローン免疫グロブリンの再編成を、推定B細胞新生物の87％（33/38）で検出しました。IGH-VDJ反応だけで、これらの症例の50％（19/38）でクローン性を検出しました。TRGの再編成は、T細胞白血病症例の97％（29/30）でクローンでした。すべての陰性対照サンプルには、ポリクローナル免疫グロブリンとTRGの再配列がありました。 結論：この研究で開発されたPARRアッセイは、ネコリンパ系新生物のクローン性を評価するのに役立ちます。不完全なIGH-DJ、KDE、およびIGLの再編成のクローン性評価は、完全なIGH-VDJ PARRのみで検出されなかったクローンB細胞新生物を特定するのに役立ちました。
背景：猫では、腫瘍性と反応性リンパ球の増殖の分化は困難な場合があります。抗原受容体再編成（PARR）のPCRは、リンパ系集団のクローン性を評価するための有用な診断ツールです。以前のネコパール研究では、完全な免疫グロブリン重鎖V-D-J（IGI-VDJ）およびT細胞受容体ガンマ（TRG）遺伝子再編成のクローン性を評価しました。 目的：完全なIGH-VDJおよびTRG再配置、および不完全なIGH-DJ、Kappa削除要素（KDE）、および免疫グロブリンラムダライトチェーン（IGL）遺伝子再配置をターゲットにしたネコPARRプライマーの感度と特異性を、定義された免疫グロブリンラムダライトチェーン（IGL）遺伝子再配置を評価することを目指しました。ネコの新生物と非腫瘍コントロール。 方法：蛍光標識されたPCRプライマーは、完全なIGH-VDJ、不完全なIGH-DJ、KDE、IGL、およびTRG遺伝子再配置を2つの多重化PCR反応で増幅するように設計され、Fragment分析によりPCR産物を分析しました。12フローの細胞測定的に確認されたB細胞リンパ腫、26の細胞学的に確認されたB細胞起源の26の細胞学的に確認された胃リンパ腫の新鮮な組織サンプル、30個のフロー細胞測定で確認されたT細胞白血病、11個の陰性対照猫がテストされました。 結果：4つの免疫グロブリンプライマーセット（IGH-VDJ、IGH-DJ、KDE、およびIgL）を使用して、クローン免疫グロブリンの再編成を、推定B細胞新生物の87％（33/38）で検出しました。IGH-VDJ反応だけで、これらの症例の50％（19/38）でクローン性を検出しました。TRGの再編成は、T細胞白血病症例の97％（29/30）でクローンでした。すべての陰性対照サンプルには、ポリクローナル免疫グロブリンとTRGの再配列がありました。 結論：この研究で開発されたPARRアッセイは、ネコリンパ系新生物のクローン性を評価するのに役立ちます。不完全なIGH-DJ、KDE、およびIGLの再編成のクローン性評価は、完全なIGH-VDJ PARRのみで検出されなかったクローンB細胞新生物を特定するのに役立ちました。
BACKGROUND: Differentiation between neoplastic and reactive lymphocytic proliferations can be challenging in cats. PCR for antigen receptor rearrangements (PARR) testing is a useful diagnostic tool to assess clonality of a lymphoid population. Previous feline PARR studies evaluated clonality of complete immunoglobulin heavy chain V-D-J (IGH-VDJ) and T-cell receptor gamma (TRG) gene rearrangements. OBJECTIVES: We aimed to evaluate the sensitivity and specificity of feline PARR primers targeting complete IGH-VDJ and TRG rearrangements, as well as incomplete IGH-DJ, kappa deleting element (Kde), and immunoglobulin lambda light chain (IGL) gene rearrangements in defined feline neoplasms and nonneoplastic controls. METHODS: Fluorescently labeled PCR primers were designed to amplify complete IGH-VDJ, incomplete IGH-DJ, Kde, IGL, and TRG gene rearrangements in two multiplexed PCR reactions, and PCR products were analyzed by fragment analysis. Fresh tissue samples from 12 flow cytometrically confirmed B-cell lymphomas, 26 cytologically confirmed gastric and renal lymphomas of presumed B-cell origin, 30 flow cytometrically confirmed T-cell leukemias, and 11 negative control cats were tested. RESULTS: Using four immunoglobulin primer sets (IGH-VDJ, IGH-DJ, Kde, and IGL), clonal immunoglobulin rearrangements were detected in 87% (33/38) of the presumed B-cell neoplasms. The IGH-VDJ reaction alone only detected clonality in 50% (19/38) of these cases. TRG rearrangements were clonal in 97% (29/30) of the T-cell leukemia cases. All negative control samples had polyclonal immunoglobulin and TRG rearrangements. CONCLUSIONS: The PARR assay developed in this study is useful for assessing clonality in feline lymphoid neoplasms. Clonality assessment of incomplete IGH-DJ, Kde, and IGL rearrangements helped identify clonal B-cell neoplasms not detected with complete IGH-VDJ PARR alone.
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