SFP型ホスホパンテチニルトランスフェラーゼの異種発現は、リポペプチドバイオサーファクタントの生合成に不可欠です

ホスホパンテテイニルトランスフェーゼは、ポリケチド、脂肪酸、および非リボソームペプチド合成酵素の活性化において、その基本的な部分から推測される非常に熱意があり、さらに増加しているバイオテクノロジー用途です。本研究は、Paenibacillus sp。からのSFP遺伝子の同定を報告しています。25.3 kDaの分子量を持つ230アミノ酸タンパク質をコードする693 bpを含むD9。アミノ酸配列Paenibacillus sp。D9 SFPは、他のPaenibacillusの他のSFPタンパク質に対して90％以上の配列同一性を明らかにしました。SFP遺伝子は、8.0の最適なpHおよび30°Cの温度で最大特異的ホスホパンテイニルトランスフェラーゼ活性を備えたアフィニティクロマトグラフィーを使用して効率的にクローン化され、効率的に回復しました。酵素はまた、広範囲のpHと温度の下で安定性を示しました。Zn2+、Cu2+、およびFe2+イオンの存在は酵素活性を改善しましたが、Ni2+、Co2+、Mg2+などの他の金属は阻害効果がありました。EDTAの導入も阻害を示しませんでした。km、vmax、kcat、およびkcat/kmでそれぞれ4.52 mg/ml、35.33 U/mg、3.64 S-1、および0.104 mm-1 S-1の値を持つ運動パラメーターが得られました。組換えBiospによって合成されたバイオサーファクタントは、表面活性であることがわかり、37°Cで5日間のインキュベーション後にグルコース基質で表面張力を33.7 mn/mに減らしました。組換え大腸菌株は、Paenibacillus sp。D9。バイオサーファクタントの放出に関連するタンパク質がエステラーゼであることが観察されたため、酢酸p-ニトロフェニルを使用した2.55 Iu/mLの高エステラーゼ活性が組換え株で観察されました。ハイパー産生組換え株による改善されたバイオサーファクタントとエステラーゼ合成の特性は、バイオテクノロジーの観点から多くの値を持っています。

Phosphopantetheinyl transferases are of tremendous enthusiasm inferable from their fundamental parts in activating polyketide, fatty acid, and non-ribosomal peptide synthetase enzymes and additionally an increasing number of biotechnological applications. The present study reports the identification of sfp gene from the Paenibacillus sp. D9, which encompasses 693 bp encoding a 230-amino acid protein with a molecular weight of 25.3 kDa. The amino acid sequence Paenibacillus sp. D9 Sfp revealed more than 90% sequence identity to other Sfp proteins from other Paenibacillus. The sfp gene was cloned and recovered efficiently using affinity chromatography with maximal specific phosphopantetheinyl transferase activity at an optimal pH of 8.0 and temperature of 30 °C. The enzyme also exhibited stability under a wide-ranging pH and temperature. The presence of Zn2+, Cu2+, and Fe2+ ions improved the enzymatic activity, while other metals such as Ni2+, Co2+, and Mg2+ had inhibitory effects. The introduction of EDTA also displayed no inhibition. Kinetic parameters were obtained having values of 4.52 mg/mL, 35.33 U/mg, 3.64 s-1, and 0.104 mM-1 s-1 for Km, Vmax, kcat, and kcat/Km, respectively. The biosurfactant synthesized by the recombinant BioSp was found to be surface active, reducing the surface tension to 33.7 mN/m on the glucose substrate after 5 days of incubation at 37 °C. The recombinant Escherichia coli strain also exhibited an improvement in biosurfactant yield (1.11 g/L) when contrasted with 0.52 g/L from Paenibacillus sp. D9. High esterase activity of 2.55 IU/mL using p-nitrophenyl acetate was observed on the recombinant strain, as the protein connected with the release of the biosurfactant was observed to be an esterase. The characteristics of improved biosurfactant and esterase synthesis by hyper-producing recombinant strain possess numerous values from biotechnology standpoint.