ヒトの調節T細胞の免疫表現型

Tregsとしても知られる調節T細胞は、免疫系と自己耐性の恒常性を維持する上で極めて重要な役割を果たします。TregsはCD3、CD4、CD25、およびFOXP3を発現しますが、CD127がありません。CD4およびCD3は、TregがサブセットであるヘルパーTリンパ球を同定します。CD25はIL-2Rαであり、Tregsで高レベルで発現する必須活性化マーカーです。FOXP3は標準転写因子であり、Tregの開発、維持、および識別に重要です。CD127はIL-7受容体であり、抑制と反比例して発現するため、Tregでダウンレギュレートされます。フローサイトメトリーは、Tregs、活性化、成熟、増殖、および機能抑制の代理に関連するいくつかのマーカーとともに、Tregを同時に測定できる強力なツールです。この章では、表面染色、固定/透過化、細胞内/核内染色、フローサイトメーター上のサンプルの獲得、結果のFCSファイルの分析と解釈など、ヒトのTregを測定するための多色のフローサイトメトリーベースのアプローチについて説明します。

Regulatory T cells, also known as Tregs, play a pivotal role in maintaining homeostasis of the immune system and self-tolerance. Tregs express CD3, CD4, CD25, and FOXP3 but lack CD127. CD4 and CD3 identify helper T lymphocytes, of which Tregs are a subset. CD25 is IL-2Rα, an essential activation marker that is expressed in high levels on Tregs. FOXP3 is the canonical transcription factor, important in the development, maintenance, and identification of Tregs. CD127 is IL-7 receptor, expressed inversely with suppression, and is therefore downregulated on Tregs. Flow cytometry is a powerful tool that is capable of simultaneously measuring Tregs along with several markers associated with subpopulations of Tregs, activation, maturation, proliferation, and surrogates of functional suppression. This chapter describes a multicolor flow cytometry-based approach to measure human Tregs, including details for surface staining, fixation/permeabilization, intracellular/intranuclear staining, acquisition of samples on a flow cytometer, plus analysis and interpretation of resulting FCS files.