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民族薬理学的関連性：Smilax Campestris Griseb（Smilacaceae）の抽出物は、伝統的な漢方薬としていくつかの炎症性疾患の治療に使用されてきました。ただし、観察された効果に関与する細胞および分子のメカニズムはとらえどころのないままです。マクロファージは、炎症反応において中心的な役割を果たすことが知られています。これらの細胞は、さまざまな危険シグナルに応じて活性化され、最終的に免疫応答を調節する炎症のいくつかのメディエーターが生成されます。上記のすべてについて、S。campestrisの一般的な使用をサポートするには科学的証拠が必要です。 研究の目的：私たちは、人気のある使用に科学的サポートを提供するために、炎症と酸化ストレスのいくつかのメディエーターの生成について、活性化されたTHP-1ヒトマクロファージにおけるS. campestris水性抽出物（SME）の抗炎症効果を調査することを目指しました。 材料と方法：SMEの特性評価は、HPLC-MS/MSによって評価されました。炎症誘発性サイトカインとケモカインの産生は、ELISAによって評価されました。メタロプロテアーゼの活動はZymographyによって評価されました。NF-κB転写因子の細胞内局在は、ウエスタンブロットによって分析されました。スーパーオキシドアニオンとグルタチオンレベルは、フローサイトメトリーによって評価されました。THP-1マクロファージでSMEによって誘導される細胞毒性もLDH放出テストによって調査されました。 結果：本研究では、水性球体の主要成分としてケルセチン（ケルセチン-3-O-グルコシド、ケルセチン-3-O-ガラクトシド、ルチンおよびケルセチン-3-ラムノシド）のカテキンおよびグリコシル化誘導体を特定しました。We found that SME significantly decreased the production of the pro-inflammatory cytokines tumour necrosis factor (TNF)- α, interleukin (IL)-1β, IL-6, IL-8 and monocyte chemoattractant protein (MCP)-1 and the activity of the metalloproteinase (MMP)-9, in lipopolysaccharide-activated macrophages derived from the単球細胞株THP-1。さらに、SMEは核分率におけるNF-κBP65サブユニットの発現を減少させました。さらに、SMEは、グルタチオンの減少のレベルを変えることなく、THP-1マクロファージでのスーパーオキシド陰イオンの産生を減少させました。 結論：これらの結果は、SMEが炎症誘発性サイトカイン、マトリックスメタロプロテイナーゼ、NF-κB転写因子の産生を阻害することにより、ヒト活性化マクロファージに抗炎症効果を発揮することを示唆しています。さらに、中小企業のHPLC-MS/MSによってカテキンとグリコシル化誘導体が同定されました。私たちの調査結果は、S。campestris抽出物の伝統的な使用に対する科学的サポートを提供します。
民族薬理学的関連性：Smilax Campestris Griseb（Smilacaceae）の抽出物は、伝統的な漢方薬としていくつかの炎症性疾患の治療に使用されてきました。ただし、観察された効果に関与する細胞および分子のメカニズムはとらえどころのないままです。マクロファージは、炎症反応において中心的な役割を果たすことが知られています。これらの細胞は、さまざまな危険シグナルに応じて活性化され、最終的に免疫応答を調節する炎症のいくつかのメディエーターが生成されます。上記のすべてについて、S。campestrisの一般的な使用をサポートするには科学的証拠が必要です。 研究の目的：私たちは、人気のある使用に科学的サポートを提供するために、炎症と酸化ストレスのいくつかのメディエーターの生成について、活性化されたTHP-1ヒトマクロファージにおけるS. campestris水性抽出物（SME）の抗炎症効果を調査することを目指しました。 材料と方法：SMEの特性評価は、HPLC-MS/MSによって評価されました。炎症誘発性サイトカインとケモカインの産生は、ELISAによって評価されました。メタロプロテアーゼの活動はZymographyによって評価されました。NF-κB転写因子の細胞内局在は、ウエスタンブロットによって分析されました。スーパーオキシドアニオンとグルタチオンレベルは、フローサイトメトリーによって評価されました。THP-1マクロファージでSMEによって誘導される細胞毒性もLDH放出テストによって調査されました。 結果：本研究では、水性球体の主要成分としてケルセチン（ケルセチン-3-O-グルコシド、ケルセチン-3-O-ガラクトシド、ルチンおよびケルセチン-3-ラムノシド）のカテキンおよびグリコシル化誘導体を特定しました。We found that SME significantly decreased the production of the pro-inflammatory cytokines tumour necrosis factor (TNF)- α, interleukin (IL)-1β, IL-6, IL-8 and monocyte chemoattractant protein (MCP)-1 and the activity of the metalloproteinase (MMP)-9, in lipopolysaccharide-activated macrophages derived from the単球細胞株THP-1。さらに、SMEは核分率におけるNF-κBP65サブユニットの発現を減少させました。さらに、SMEは、グルタチオンの減少のレベルを変えることなく、THP-1マクロファージでのスーパーオキシド陰イオンの産生を減少させました。 結論：これらの結果は、SMEが炎症誘発性サイトカイン、マトリックスメタロプロテイナーゼ、NF-κB転写因子の産生を阻害することにより、ヒト活性化マクロファージに抗炎症効果を発揮することを示唆しています。さらに、中小企業のHPLC-MS/MSによってカテキンとグリコシル化誘導体が同定されました。私たちの調査結果は、S。campestris抽出物の伝統的な使用に対する科学的サポートを提供します。
ETHNOPHARMACOLOGICAL RELEVANCE: Extracts of Smilax campestris Griseb (Smilacaceae) have been employed in the treatment of several inflammatory diseases as a traditional herbal medicine. However, the cellular and molecular mechanisms involved in the observed effects remain elusive. Macrophages are known to play a central role in inflammatory responses. These cells are activated in response to a diversity of danger signals and produce several mediators of inflammation that eventually regulate the immune response. For all the above mentioned, scientific evidence is required to support the popular use of S. campestris. AIM OF THE STUDY: We aimed to investigate the anti-inflammatory effect of S. campestris aqueous extract (SME) in activated THP-1 human macrophages, on the production of some mediators of inflammation and oxidative stress in order to provide scientific support for its popular use. MATERIALS AND METHODS: The characterization of SME was assessed by HPLC-MS/MS. The production of the pro-inflammatory cytokines and chemokines was evaluated by ELISA. The activity of metalloproteases was evaluated by zymography. The subcellular localization of the NF-κB transcription factor was analysed by Western blot. The superoxide anion and glutathione levels were assessed by flow cytometry. The cytotoxicity induced by SME in THP-1 macrophages was also investigated by the LDH release test. RESULTS: In the present study, we have identified catechin and glycosylated derivatives of quercetin (quercetin-3-O-glucoside, quercetin-3-O-galactoside, rutin and quercetin-3-rhamnoside) as major components of the aqueous SME. We found that SME significantly decreased the production of the pro-inflammatory cytokines tumour necrosis factor (TNF)- α, interleukin (IL)-1β, IL-6, IL-8 and monocyte chemoattractant protein (MCP)-1 and the activity of the metalloproteinase (MMP)-9, in lipopolysaccharide-activated macrophages derived from the monocytic cell line THP-1. Furthermore, SME diminished the expression of NF-κB p65 subunit in the nuclear fraction. In addition, SME decreased the production of superoxide anion in THP-1 macrophages, without altering the levels of reduced glutathione. CONCLUSION: These results suggest that SME exerts its anti-inflammatory effects in human activated macrophages by inhibiting the production of pro-inflammatory cytokines, matrix metalloproteinases and the NF-κB transcription factor pathway along with a reduction of oxidative stress mediators. Moreover, catechin and glycosylated derivatives of were identified by HPLC-MS/MS in SME. Our findings provide scientific support for the traditional use of the S. campestris extracts.
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