新規切断可能なジペプチドリンカーの組み込みによる抗体薬物コンジュゲート（ADC）のリソソーム活性化を最適化する

ペプチドリンカーは複数の臨床段階ADCで使用されていますが、効率的なリソソームタンパク質分解と循環の安定性のためのペプチドリンカーの最適化に関する報告はほとんどありません。複数のジペプチドリンカーをタンパク質溶解の効率についてスクリーニングし、それらを現在クリニックで評価しているジペプチドリンカー、Val-Cit、Val-Ala、およびAla-Alaと比較しました。初期スクリーンから選択された鉛ジペプチドリンカーは、細胞処理、in vitro細胞毒性活性、血漿安定性、およびin vivoの有効性を評価するために、インドリノベンゾジアゼピン二量体（IGN）ペイロードを含むADCに組み込まれました。L-アミノ酸を持ついくつかのジペプチドリンカーを含むADCは、L-ALA-L-ALAリンクADCと比較して、標的癌細胞でより速いリソソームプロセシングを示しました。リンカー処理速度のこれらの分散は、おそらく、テストされた細胞株および異種移植片のいくつかのペプチドリンカーのADCの閾値毒性物質異議剤レベルの蓄積のために、おそらくペプチドリンカーADC間でin vitroおよびin vivo活性をもたらすことはありませんでした。L-アミノ酸ジペプチドリンカーを備えたADCは、D-ALA-D-ALAジペプチドリンカーを備えたADCと、非クレーブできないリンカーを備えたADCを備えたADCと比較して、複数の細胞株で優れたin vitro細胞毒性効率を示しました。この作業は、ADC用の安定したリソソーム切断可能なペプチドリンカーのツールボックスに追加されます。

Although peptide linkers are used in multiple clinical-stage ADCs, there are only few reports on optimizing peptide linkers for efficient lysosomal proteolysis and for stability in circulation. We screened multiple dipeptide linkers for efficiency of proteolysis and compared them to the dipeptide linkers currently being evaluated in the clinic: Val-Cit, Val-Ala, and Ala-Ala. Lead dipeptide linkers selected from the initial screen were incorporated into ADCs with indolinobenzodiazepine dimer (IGN) payloads to evaluate cellular processing, in vitro cytotoxic activity, plasma stability, and in vivo efficacy. ADCs with several dipeptide linkers bearing l-amino acids showed faster lysosomal processing in target cancer cells compared to the l-Ala-l-Ala linked ADC. These variances in linker processing rates did not result in different in vitro and in vivo activities among peptide linker ADCs, presumably due to accumulation of threshold cytotoxic catabolite levels for ADCs of several peptide linkers in the cell lines and xenografts tested. ADCs with l-amino acid dipeptide linkers exhibited superior in vitro cytotoxic potencies in multiple cell lines compared to an ADC with a d-Ala-d-Ala dipeptide linker and an ADC with a noncleavable linker. This work adds to the toolbox of stable, lysosomally cleavable peptide linkers for ADCs.