人間の多能性幹細胞における礎石の焦点癒着の超解像度アーキテクチャ

主要な転写プログラムが多能性を維持するために重要であることは明らかですが、細胞外マトリックスへの細胞接着の要件は不十分に定義されたままです。ヒト多能性幹細胞（HPSC）は、アクチン環と大きな安定した礎石焦点癒着（FA）に囲まれたコロニーを形成します。超分解2色干渉光時代の光活性化局在顕微鏡を使用して、礎石の癒着の3次元アーキテクチャを調べ、FAタンパク質の垂直ラミネーションを報告し、以前に研究された焦点付着とは異なる3つの主要な構造的特徴を報告します。Cornerstone FAの端での高密度、垂直カンクが豊富なタンパク質壁に隣接して、2）ビンキュリンは以前に報告されたよりも高い局所化し、ヘッドアボーブテールの向きを示し、3）驚くべきことに、アクチンとα-アクチニンが存在します2つの離散Z層で。最後に、植民地内の漢族の枯渇がFAのパターニングとアクチン組織を減少させ、HPSCコロニー建築におけるカンクの役割を示していると報告しています。

While it is clear that key transcriptional programmes are important for maintaining pluripotency, the requirement for cell adhesion to the extracellular matrix remains poorly defined. Human pluripotent stem cells (hPSCs) form colonies encircled by an actin ring and large stable cornerstone focal adhesions (FA). Using superresolution two-colour interferometric photo-activated localisation microscopy, we examine the three-dimensional architecture of cornerstone adhesions and report vertical lamination of FA proteins with three main structural features distinct from previously studied focal adhesions: 1) integrin β5 and talin are present at high density, at the edges of cornerstone FA, adjacent to a vertical kank-rich protein wall, 2) vinculin localises higher than previously reported, displaying a head-above-tail orientation, and 3) surprisingly, actin and α-actinin are present in two discrete z-layers. Finally, we report that depletion of kanks diminishes FA patterning, and actin organisation within the colony, indicating a role for kanks in hPSC colony architecture.