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著者らは、免疫グロブリンE(IgE)の競合的免疫測定法で、プラチナナノクラスター(PTNC)をバイモーダルラベルとして使用することを説明しています。蛍光測定と誘導結合血漿 - 質量分析(ICP -MS)の両方が使用されます。リガンドとしてリポ酸を使用したPTNC合成の最適化が実施されました。合成の時間とPTNCS前駆体混合物に追加されたNaOHの効果は、強い赤蛍光と低サイズの分散症でPTNCを取得することを目的として最適化されました。最大蛍光は、455/620 nmの励起/発光波長で得られました。PTNCの平均直径(1.5 nm)と結晶構造(顔中心の立方体構造)は、HR-TEMによって決定されました。各PTNCには平均で116個のPT原子が含まれていると計算されました。PTNCを使用したIgEに対する抗体(AB)の標識は、認識能力と蛍光強度の観点から最適化されました。1:11のモル比(AB:PTNC)が最適であることがわかりました。IgEの競合的免疫測定法が開発され、ICP-MS(195ptを測定)と蛍光測定の両方を使用して検出が行われました。フルオロ免疫アッセイの検出限界(LOD)は、IgEの0.6 ng ML-1です。ICP-MSメソッドのLODは0.08 ng ML-1です。この方法は、ICP-MSによる4つの(SPIKED)血清サンプルを分析することにより評価されました。希釈を除く前処理は必要ありません。結果は、コマーシャルELISAキットで得られたものと好意的に比較されました。ヒトIgに対する抗体を使用したヒト血清中の免疫グロブリンE(Ig E)のバイモーダル定量(蛍光およびICP-MS)のバイモーダル定量(蛍光およびICP-MS)のグラフィカル抽象的な概略図。いくつかの白金ナノクラスター(NC)が免疫プローブとして標識されています。元素質量分析(MS)は、ナノクラスターあたりのプラチナ原子の数が多いため、信号の高増幅を可能にします(〜116 pt/nc)。
著者らは、免疫グロブリンE(IgE)の競合的免疫測定法で、プラチナナノクラスター(PTNC)をバイモーダルラベルとして使用することを説明しています。蛍光測定と誘導結合血漿 - 質量分析(ICP -MS)の両方が使用されます。リガンドとしてリポ酸を使用したPTNC合成の最適化が実施されました。合成の時間とPTNCS前駆体混合物に追加されたNaOHの効果は、強い赤蛍光と低サイズの分散症でPTNCを取得することを目的として最適化されました。最大蛍光は、455/620 nmの励起/発光波長で得られました。PTNCの平均直径(1.5 nm)と結晶構造(顔中心の立方体構造)は、HR-TEMによって決定されました。各PTNCには平均で116個のPT原子が含まれていると計算されました。PTNCを使用したIgEに対する抗体(AB)の標識は、認識能力と蛍光強度の観点から最適化されました。1:11のモル比(AB:PTNC)が最適であることがわかりました。IgEの競合的免疫測定法が開発され、ICP-MS(195ptを測定)と蛍光測定の両方を使用して検出が行われました。フルオロ免疫アッセイの検出限界(LOD)は、IgEの0.6 ng ML-1です。ICP-MSメソッドのLODは0.08 ng ML-1です。この方法は、ICP-MSによる4つの(SPIKED)血清サンプルを分析することにより評価されました。希釈を除く前処理は必要ありません。結果は、コマーシャルELISAキットで得られたものと好意的に比較されました。ヒトIgに対する抗体を使用したヒト血清中の免疫グロブリンE(Ig E)のバイモーダル定量(蛍光およびICP-MS)のバイモーダル定量(蛍光およびICP-MS)のグラフィカル抽象的な概略図。いくつかの白金ナノクラスター(NC)が免疫プローブとして標識されています。元素質量分析(MS)は、ナノクラスターあたりのプラチナ原子の数が多いため、信号の高増幅を可能にします(〜116 pt/nc)。
The authors describe the use of platinum nanoclusters (PtNCs) as bimodal labels in a competitive immunoassay for immunoglobulin E (IgE). Both fluorometry and inductively coupled plasma - mass spectrometry (ICP-MS) are used. Optimization of the PtNCs synthesis using lipoic acid as ligand was carried out. The time for synthesis and the effect of NaOH added to the PtNCs precursor mixture was optimized with the aim to obtain PtNCs with strong red fluorescence and low size dispersity. Maximal fluorescence was obtained at excitation/emission wavelengths of 455/620 nm. The average diameter (1.5 nm) and crystal structure (face-centered cubic structure) of the PtNCs were determined by HR-TEM. It was calculated that each PtNC contains 116 Pt atoms at average. Labelling of the antibody (Ab) against IgE with PtNCs was optimized in terms of recognition capabilities and fluorescence intensity. A molar ratio (Ab:PtNCs) of 1:11 is found to be best. A competitive immunoassay for IgE was developed and detection was carried out by using both ICP-MS (by measuring 195Pt) and fluorometry. The limit of detection (LOD) of the fluoroimmunoassay is 0.6 ng mL-1 of IgE. The LOD of the ICP-MS method is as low as 0.08 ng mL-1. The method was evaluated by analyzing four (spiked) serum samples by ICP-MS. No sample pretreatment excepting dilution is needed. Results compared favorably with those obtained by a commercial ELISA kit. Graphical abstract Schematic representation of the bimodal quantification (fluorescence and ICP-MS) of immunoglobulin E (Ig E) in human serum using antibody against human Ig E, labelled with several platinum nanoclusters (NCs) as immunoprobe. Elemental mass spectrometry (MS) allows high amplification of the signal because of the high number of platinum atoms per nanocluster (~116 Pt/NC).
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