PD-1/PD-L1経路の活性化により、Th1/Th2およびTreg/Th17細胞の不均衡が回復します。

この研究の目的は、サイトカインの変化と、免疫血小板減少性紫斑病（ITP）患者のT細胞機能に対するプログラムされた死リガンド1（PD-L1）シグナル伝達経路の効果を調査することを目的としています。健全なコントロールとして募集されました。その後、ITP患者の全血と健康的なコントロールがそれぞれ収集されました。SPD-L1/Anti-PD-1を使用して、プログラムされた死亡（PD-1）/PD-L1シグナル伝達経路を活性化またはブロックしました。末梢血単核細胞（PBMC）でのPD-1およびPD-L1の発現は、フローサイトメトリーによって検出されました。PBMCは、分化クラスター（CD3）、分化クラスター28（CD28）、および植物骨凝集素（PHA）で48時間処理しました。SPD-1、SPD-L1、およびサイトカインの血清レベルは、健康なコントロールグループと比較した酵素結合免疫吸着アッセイ（ELISA）によって測定されました。-DR+ CD11C+ DC細胞はITP患者で増加しました。ITP患者の血清中のインターフェロンガンマ（IFN-γ）、インターロイキン-17（IL-17）、およびSPD-1のレベルが増加しましたが、IL-4および形質転換成長因子-β（TGF-β）は増加しました。減少。さらに、SPD-1のレベルは、血小板数と負の相関がありました。一貫して、ITP患者のPBMCの培養上清におけるCD3、CD28、およびPHA、IFN-γおよびIL-17レベルでの治療後、IL-4およびTGF-βレベルは有意に低かったのに対し、ITP患者のPBMCの培養上清レベルは有意に高かった。さらに、ITP患者からのPBMCSによって分泌されるIFN-γおよびIL-17レベルは、SPD-L1投与後に減少しましたが、IL-4およびTGF-βレベルは増加しました。ITPグループのIFN-γのレベルは、抗PD-1閉塞後も高いままでしたが、IL-4、TGF-β、およびIL-17のレベルは有意に影響を受けませんでした。SPD-1はPD-の機能障害を引き起こす可能性があります。1/PD-L1シグナル伝達経路、およびそのレベルはITP患者の重症度に関連しています。SPD-L1によるPD-1/PD-L1の活性化は、ITP患者のTh1/Th2およびTreg/Th17細胞サブタイプの不均衡を回復する可能性がありますが、抗PD-1はIFN-γ産生を促進することにより疾患を悪化させる可能性があります。

This study aims to investigate the changes of cytokines and the effect of programmed death ligand 1 (PD-L1) signaling pathway on T cell function in patients with immune thrombocytopenic purpura (ITP).Totally, 40 untreated ITP patients were recruited and 30 healthy people were recruited as the healthy control. Then whole blood of ITP patients and healthy control was collected, respectively. The sPD-L1/anti-PD-1 was used to activate or block the programmed death (PD-1)/PD-L1 signaling pathway. The expression of PD-1 and PD-L1 on peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) were detected by flow cytometry. PBMCs were treated with cluster of differentiation (CD3), cluster of differentiation 28 (CD28), and phytohaemagglutinin (PHA) for 48 hours. Serum levels of sPD-1, sPD-L1, and cytokines were measured by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA).Compared with the healthy control group, the percentages of PD-1+CD3+CD4+ T cells and PD-L1+HLA-DR+CD11c+ DC cells were increased in ITP patients. The levels of interferon-gamma (IFN-γ), interleukin-17 (IL-17), and sPD-1 in the serum of ITP patients were increased, while IL-4 and transforming growth factor-β (TGF-β) were decreased. Additionally, the level of sPD-1 was negatively correlated with the platelet count. Consistently, after treatment with CD3, CD28, and PHA, IFN-γ and IL-17 levels in culture supernatant of PBMCs from ITP patients were significantly higher than those from healthy controls whereas IL-4 and TGF-β levels were significantly lower. Furthermore, IFN-γ and IL-17 levels secreted by PBMCs from ITP patients decreased after sPD-L1 administration, however, IL-4 and TGF-β levels were increased. The level of IFN-γ in ITP group remained higher after anti-PD-1 blockage, but the levels of IL-4, TGF-β, and IL-17 were not significantly influenced.sPD-1 may cause the dysfunction of PD-1/PD-L1 signaling pathway, and its level is related to the severity of ITP patients. Activation of PD-1/PD-L1 with sPD-L1 may restore the imbalance of Th1/Th2 and Treg/Th17 cell subtypes in ITP patients but anti-PD-1 may exacerbate disease by enhancing IFN-γ production.