高解像度の正確な軌道質量分析と並列反応モニタリング（PRM）を使用したサイトカイニンの定量化

サイトカイニン（CK）は、植物ホルモンとして作用するアデニン誘導体です。これらのシグナル伝達分子は、植物の細胞分裂と分化、臓器の成長、老化を制御し、生物環境と非生物的環境との植物の相互作用を調整します。CKは主に植物ベースの物質として認識されていますが、CKは微生物、昆虫、哺乳類、人間など、さまざまな生活の領域で発見されています。植物では、CKSは微量で作用し、しばしばフェムトーモル濃度が低くなります。したがって、複雑な生物学的行列からそれらを正確に検出して定量化するには、敏感で正確な分析手法が必要です。ここでは、並列反応モニタリング（PRM）ベースのアプローチを使用して、高解像度でQEXACTIVE ORBITRAP質量分析計を使用して、最初の包括的なCK定量化法を報告します。現在の方法は、トリプル四重極質量分析計でのCKプロファイリングに以前に使用されていた複数の反応モニタリング（MRM）メソッドで進行します。この方法では、質量精度の向上と、特異性が向上し、トリプル四重極機器に匹敵する感度を伴う複合測定のための完全な生成物イオン質量スペクトル（MS/MS）を提供します。提示されたPRMアプローチは、いくつかの生物学的サンプルで32 cksを定量化するために正常に適用されました。

Cytokinins (CKs) are adenine derivatives that act as phytohormones. These signaling molecules control plant cell division and differentiation, organ growth, and senescence, and they orchestrate plant interactions with biotic and abiotic environments. While CKs are predominately recognized as plant-based substances, CKs have been found across different domains of life, including microorganisms, insects, mammals, and humans. In plants, CKs act at trace, often low femtomolar concentrations; therefore, sensitive and precise analytical techniques are required to accurately detect and quantify them from complex biological matrices. Here, we report the first comprehensive CK quantification method using a QExactive Orbitrap mass spectrometer in high-resolution with a parallel reaction monitoring (PRM)-based approach. The current method progresses upon multiple reaction monitoring (MRM) methods, previously used for CK profiling on triple quadrupole mass spectrometers. This method offers improved mass accuracy and the complete product ion mass spectra (MS/MS) for compound determination with increased specificity, and sensitivity comparable with triple quadrupole instruments. The presented PRM approach was successfully applied to quantify 32 CKs in several biological samples.