天然のAkt阻害剤のスワルティアマリンは、Akt-PHドメインを標的とし、下流のシグナル伝達を阻害し、炎症を緩和します

Flos Lonicerae japonicaeの代表的なコンポーネントであるSwertiamarin（SW）は、感染を予防する際に重要な活性を発揮することが報告されています。この研究では、SWとそのターゲットの詳細を明確にして、SWの根本的な抗炎症メカニズムを調査することを目指しています。アジド標識SWプローブは、タンパク質標的釣り用に合成され、結果はAKTを具体的に捕獲できることを実証しました。AKTとの免疫蛍光共局在は、SWプローブとアルキニルCy5のクリック反応によって実装されました。結果は、AktがSWのターゲットの1つであることを示しました。次に、AKT阻害剤のセットと膜転座実験を使用した競合的な組み合わせ実験により、SWがAktのPleckstrin相同性（PH）ドメインを標的とする可能性があることが確認されました。この特異的結合は、Ser473とThr308の両方でAktのリン酸化を直接非アクティブ化し、IKKとNF-κBの脱リン酸化を誘導しました。最後に、炎症誘発性サイトカイン（TNF-α、IL-6、およびIL-8）は、AKT-PHドメインを標的とすることにより、細胞と急性肺損傷動物モデルの両方で抑制されました。この研究は、SWが自然なAKT阻害剤として機能し、AKT-PHドメインを直接調節し、下流の炎症性分子を阻害することにより、有意な抗炎症活性を示すことを実証しました。

Swertiamarin (SW), a representative component in Flos Lonicerae Japonicae, has been reported to exert significant activity in preventing infections. In this research, we aim to clarify the details of SW and its target to explore SW's underlying anti-inflammatory mechanisms. An azide labeled SW probe was synthesized for protein target fishing, and the results demonstrated that AKT could be captured specifically. Immunofluorescence colocalization with AKT was implemented by a click reaction of the SW probe and alkynyl CY5. The result showed that AKT was one of the targets of SW. Then, a competitive combination experiment using a set of AKT inhibitors and a membrane translocation experiment confirmed that SW might target the pleckstrin homology (PH) domain of AKT. This specific binding directly deactivated the phosphorylation of AKT on both Ser473 and Thr308, which induced the dephosphorylation of IKK and NF-κB. Finally, proinflammatory cytokines (TNF-α, IL-6, and IL-8) were suppressed both in cells and in acute lung injury animal model by targeting AKT-PH domain. This study demonstrated that SW functions as a natural AKT inhibitor and presents significant anti-inflammatory activity by directly regulating the AKT-PH domain and inhibiting downstream inflammatory molecules.