C型肝炎ウイルス非構造性タンパク質5a脂質脂質代謝症を調節することにより、AMPK/SREBP-1Cシグナル伝達を調節することにより

背景：脂肪症は、慢性C型肝炎ウイルス（HCV）感染に関連する重要な臨床症状です。脂質代謝の主要なメディエーターであるAMP活性化プロテインキナーゼ（AMPK）は、HCV関連の肝脂肪症を調節しますが、根本的なメカニズムはあいまいなままです。ここでは、AMPK/SREBP-1C経路によるHCV非構造タンパク質5a（NS5A）誘導脂質蓄積のメカニズムを調査しました。 方法：尾静脈を介してNS5Aタンパク質（遺伝子型3A）を発現する組換えレンチウイルス粒子を注入することにより、モデルマウスを生成しました。アラニンアミノトランスフェラーゼ（ALT）、遊離脂肪酸（FFA）およびトリグリセリド（TG）の血清レベルを調べました。H＆EおよびオイルレッドO染色を使用して、脂質液滴を調べました。免疫組織化学染色、定量的リアルタイムPCR、およびウエスタンブロッティングを使用して、脂肪生成遺伝子の発現を決定しました。 結果：我々の結果は、ALT、FFAS、TGの血清レベル、ならびに肝脂質滴の蓄積が、NS5A発現レンチウイルス粒子に感染したマウスで大幅に増加したことを示しました。NS5aはAMPKリン酸化を阻害し、in vivoおよびin vitroで、ステロール調節要素結合タンパク質-1C（SREBP-1C）、アセチルコエンザイムAカルボキシラーゼ1（ACC1）および脂肪酸シンターゼ（FASN）の発現レベルを増加させました。さらなる調査により、AMPKの薬理学的活性化または異所性発現により、SREBP-1C、ACC1およびFASNのアップレギュレーションが中和し、NS5Aによって誘発される肝脂質蓄積を改善することが明らかになりました。SREBP-1Cの異所性発現は、AMPKの薬理学的活性化によって劇的に逆転したNS5a誘発性肝脂質蓄積を促進しました。 結論：集合的に、NS5AがAMPK/SREBP-1C経路を介して肝臓の脂質蓄積を誘導することを実証します。

BACKGROUND: Steatosis is an important clinical manifestation associated with chronic hepatitis C virus (HCV) infection. AMP-activated protein kinase (AMPK), a major mediator of lipid metabolism, regulates HCV-associated hepatic steatosis, but the underlying mechanisms remain obscure. Here we investigated the mechanism of HCV nonstructural protein 5A (NS5A)-induced lipid accumulation by the AMPK/SREBP-1c pathway. METHODS: We generated model mice by injecting recombinant lentiviral particles expressing the NS5A protein (genotype 3a) via the tail vein. The serum levels of alanine aminotransferase (ALT), free fatty acids (FFAs) and triglycerides (TG) were examined. H&E and Oil Red O staining were used to examine lipid droplets. Immunohistochemistry staining, quantitative real-time PCR and Western blotting were used to determine the expression of lipogenic genes. RESULTS: Our results showed that the serum levels of ALT, FFAs and TG, as well as the accumulation of hepatic lipid droplets, were increased significantly in mice infected with NS5A-expressing lentiviral particles. NS5A inhibited AMPK phosphorylation and increased the expression levels of sterol regulatory element binding protein-1c (SREBP-1c), acetyl-coenzyme A carboxylase 1 (ACC1) and fatty acid synthase (FASN) in vivo and in vitro. Further investigation revealed that pharmacological activation or ectopic expression of AMPK neutralized the upregulation of SREBP-1c, ACC1 and FASN, and ameliorated hepatic lipid accumulation induced by NS5A. Ectopic expression of SREBP-1c enhanced NS5A-induced hepatic lipid accumulation, which was dramatically reversed by pharmacological activation of AMPK. CONCLUSIONS: Collectively, we demonstrate that NS5A induces hepatic lipid accumulation via the AMPK/SREBP-1c pathway.