クルクミンは、AKT/MTORシグナル伝達経路を阻害することにより、非小細胞肺癌細胞におけるガルバン酸誘発抗腫瘍効果を増強します

背景：セスキテルペンクマリンとして知られるガルバン酸（GBA）は、異なる細胞でさまざまな抗腫瘍活性を持っていることが報告されています。私たちの研究は、クルクミンが非小細胞肺癌細胞におけるGBA誘発抗腫瘍効果を増強するかどうかを調査することを目的としていました。 材料と方法：細胞生存率に対するGBAとクルクミンの組み合わせ効果をMTT分析によって調べました。細胞アポトーシスは、フローサイトメトリー分析によって評価されました。オートファジーは、GFP-LC3アデノウイルスに感染した後に共焦点顕微鏡で観察されたオートファゴソームによって定義されました。さらに、細胞アポトーシス、オートファジー、およびAkt/mTORシグナル伝達経路に関与するマーカータンパク質の発現は、QRT-PCRおよびウエスタンブロッティングアッセイによって推定されました。 結果：40μMGBAと組み合わせた15μMのクルクミンは、細胞生存率においてより良い相乗効果を得ることができ、特にA549セルで細胞アポトーシスを顕著に誘導しました。その上、GBAとの提携におけるクルクミンは、細胞の移動と浸潤を大幅に阻害する可能性があります。GFP-LC3感染実験により、クルクミンはGBA誘導細胞オートファジーを増強し、Akt/mTOR/P70S6Kシグナル伝達経路のリン酸化を抑制できることを詳しく説明しました。さらに、クルクミンおよびGBA治療によって誘発される移動、アポトーシス、およびオートファジーの反応は、MTOR阻害剤ラパマイシンとAkt活性化因子インスリンによって逆転する可能性があります。

BACKGROUND: Galbanic acid (GBA), which is known as a sesquiterpene coumarin, has been reported to have various anti-tumor activities in different cells. Our study intended to investigate whether curcumin potentiates GBA-induced anti-tumor effect in non-small cell lung cancer cells. MATERIALS AND METHODS: The combined effect of GBA and curcumin on cell viability was examined by MTT analysis. Cellular apoptosis was evaluated by flow cytometry analysis. Autophagy was defined by autophagosome observed by confocal microscopy after infected with GFP-LC3 adenovirus. In addition, the expression of marker proteins involved in cell apoptosis, autophagy, and Akt/mTOR signaling pathway were estimated by qRT-PCR and Western Blotting assay. RESULTS: 15 μM curcumin combined with 40 μM GBA could obtain better synergistic repressive efficacy on cell viability and notably induced cell apoptosis in A549 cells. Besides, curcumin in alliance with GBA could significantly inhibit cell migration and invasion. GFP-LC3 infection experiments elaborated that curcumin could potentiate GBA induced cell autophagy and restrain the phosphorylation of Akt/mTOR/P70s6k signaling pathway. What's more, the reaction of migration, apoptosis, and autophagy induced by curcumin and GBA treatment could be reversed by mTOR inhibitor rapamycin and AKT activator insulin.