MDM2-P53シスプラチンとの相互作用阻害剤は、ビトロの結腸癌および前立腺癌細胞のアポトーシスを促進します

目的：RITA（MDM2-P53相互作用阻害剤）とその作用と遺伝毒性薬シスプラチンの効果を研究するために、COLO-205結腸癌およびPC-3前立腺癌細胞で評価されました。 方法：遺伝毒性薬物シスプラチンを伴うRITAの細胞毒性およびアポトーシスの可能性を決定するためのさまざまなビトロパラメーターを評価しました。細胞毒性効果の増強は、MTTアッセイとコロニー形成アッセイ、ETBR/ACOアッセイによる細胞死のメカニズム、およびアポトーシスのメカニズムをカスパーゼ-3放出アッセイによって決定しました。 結果：MTTからの調査結果は、それぞれ5+5µmおよび10+10µm濃度のシスプラチンとRITAの最良の強力な組み合わせを確認しました。これらの組み合わせは、その化学療法効果についてさらに評価され、単剤療法と比較して組み合わせのコロニー数の有意な減少が確認されました。また、ETBR/ACOアッセイの結果は、コロニー形成アッセイと一致していました。アポトーシス活性の場合、シスプラチンとリタの濃度を増加させること（10µm）は、アポトーシス活性にあまり影響を与えず、低用量（5µm）濃度の濃度と等しく効果的であることがわかったことが注目されました。同じ結果が、両方の細胞株にカスパーゼ-3放出効果で見られました。 結論：私たちの本研究は、MDM2-P53相互作用をブロックすることによりp53の薬理学的活性化が有望ながん治療戦略であり、シスプラチンと組み合わせてRITAを使用することで、その用量を減らすことによってシスプラチンの毒性効果を低下させるだけでなく、増加するという説得力のある証拠を提供します。アポトーシス効果は、結腸癌と前立腺癌の両方に対する臨床評価を保証します。

OBJECTIVE: To study the effect of RITA (MDM2-p53 interaction inhibitor) and its action along with genotoxic drug cisplatin was evaluated on COLO-205 colon cancer and PC-3 prostate cancer cells. METHOD: Various in-vitro parameters to determine cytotoxic and apoptotic potential of RITA with genotoxic drug cisplatin were evaluated. The potentiation of cytotoxic effect was evaluated using MTT assay and colony forming assay, mechanism of cell death by Etbr/AcO assay and the mechanism of apoptosis was determined by caspase-3 release assay. RESULTS: The findings from MTT confirmed the best possible potent combination of 5+5µM and 10+10µM concentration of Cisplatin and RITA respectively. These combinations were further evaluated for its chemo sensitizing effect which confirmed the significant reduction in number of colonies in combination as compared to monotherapy. Also, the results of Etbr/AcO assay were in line with the colony forming assay. For apoptotic activity, it was noted that increasing the concentration of cisplatin and RITA (10µM), did not affect much to apoptotic activity and was found to be equally effective to that of low dose (5µM) concentration. The same results were seen in Caspase-3 release effect on both the cell lines. CONCLUSION: Our present study provides compelling evidence that pharmacological activation of the p53 by blocking the MDM2-p53 interaction is a promising cancer therapeutic strategy and using RITA in combination with Cisplatin not only decrease the toxic effect of Cisplatin by decreasing its dose but also increasing the apoptotic effect, warrants clinical evaluation on both colon and prostate cancer.