クロロフィラーゼ2の細胞内局在は、シロイヌナズナの老化中のクロロフィル分解に関与していないことを明らかにしています。

クロロフィル（CHL）からのフィトール鎖の放出を触媒するクロロフィラーゼ（CLH）は、CHL分解の最初のステップを触媒するために長い間考慮されてきました。シロイヌナズナには2つのアイソフォームのCLH（Clh1およびClh2）が含まれており、Clh1は以前にトノプラストと小胞体に局在することが実証されており、Chl分解には関与していません。対照的に、ClH2は葉緑体局在のために予測されたシグナルペプチドを所有しており、シロイヌナズナや他の種のCLHSの系統発生分析も、CLH2がCLH1とは異なるクレードを形成することを示しています。したがって、CLH2がCHLの故障に関与している可能性は残っています。現在の研究では、CLH2または両方のCLHアイソフォームを欠くCLH変異体が老化の誘導後に分析されました。結果は、CLHノックアウトラインがまだ野生型植物と同じ速度でCHLを分解できることを示しています。トランスジェニックシロイヌナズナ植物が生成され、CLH2またはCLH2のいずれかが黄色の蛍光タンパク質（YFP）に融合されたCLH2またはCLH2のいずれかを構成的に発現しました。共焦点顕微鏡を使用して行われた観察により、Clh2-YFPは葉緑体の外部に位置していることが示されました。さらに、過剰発現植物では、CLH2は膜分別後のトノプラストおよび小胞体画分に濃縮されました。集合データに基づいて、CLH2はシロイヌナズナの老化中のCHLの崩壊に関与していないと結論付けます。

Chlorophyllase (CLH), which catalyzes the release of the phytol chain from chlorophyll (Chl), has been long considered to catalyze the first step of Chl degradation. Arabidopsis contains two isoforms of CLH (CLH1 and CLH2), and CLH1 was previously demonstrated to be localized in tonoplast and endoplasmic reticulum, and not be involved in Chl degradation. In contrast, CLH2 possesses a predicted signal-peptide for chloroplast localization, and phylogenetic analysis of CLHs in Arabidopsis and other species also indicate that CLH2 forms a different clade than CLH1. Therefore, the possibility remains that CLH2 is involved in the breakdown of Chl. In the current study, clh mutants lacking CLH2 or both CLH isoforms were analyzed after the induction of senescence. Results indicated that the clh knockout lines were still able to degrade Chl at the same rate as wild-type plants. Transgenic Arabidopsis plants were generated that constitutively expressed either CLH2 or CLH2 fused to a yellow fluorescent protein (YFP). Observations made using confocal microscopy indicated that CLH2-YFP was located external to chloroplasts. Additionally, in overexpression plants, CLH2 was enriched in tonoplast and endoplasmic reticulum fractions following membrane fractionation. Based on the collective data, we conclude that CLH2 is not involved in Chl breakdown during senescence in Arabidopsis.