著名医師による解説が無料で読めます
すると翻訳の精度が向上します
ヒト誘導性多能性幹細胞由来心筋細胞（HIPSC-CM）は、心血管チャネル障害をモデル化し、薬物安全性薬理学のために広く使用された信頼できる細胞源に進化しました。ただし、HIPSC-CMの電気生理学的および薬理学的応用は、労働集約的で低い出力を生成する手動パッチクランプ技術によって妨げられています。自動化されたパッチクランプ技術は、この問題を克服する可能性を示しています。ここでは、自動化されたパッチクランプに適した滑らかな膜を備えた膨大な数のシングルリラックスしたhipsc-CMを収穫できる新しい解離方法について説明します。自動化された全細胞パッチクランプテクノロジーを使用して、セルキャプチャと全細胞アクセスの高い成功率を報告します（約70％）。NA+電流（INA）、L型Ca2+電流（ICAL）、2つの特定のK+電流、一時的な外向きK+電流（ITO）など、さまざまな成功率でいくつかの電流とペースの活動電位（AP）を特定して記録することができます。内向き整流器K+電流（IK1）。さらに、AP記録のIK1を事実上増加させるために、動的電流クランプを適用しました。私たちの研究は、自動化されたパッチクランプ技術を使用して、HIPSC-CMの関連するイオン電流とAPを調査できることを示唆しています。自動化されたパッチクランプとHIPSC-CMテクノロジーの組み合わせは、将来的に幅広いアプリケーションを約束します。
ヒト誘導性多能性幹細胞由来心筋細胞（HIPSC-CM）は、心血管チャネル障害をモデル化し、薬物安全性薬理学のために広く使用された信頼できる細胞源に進化しました。ただし、HIPSC-CMの電気生理学的および薬理学的応用は、労働集約的で低い出力を生成する手動パッチクランプ技術によって妨げられています。自動化されたパッチクランプ技術は、この問題を克服する可能性を示しています。ここでは、自動化されたパッチクランプに適した滑らかな膜を備えた膨大な数のシングルリラックスしたhipsc-CMを収穫できる新しい解離方法について説明します。自動化された全細胞パッチクランプテクノロジーを使用して、セルキャプチャと全細胞アクセスの高い成功率を報告します（約70％）。NA+電流（INA）、L型Ca2+電流（ICAL）、2つの特定のK+電流、一時的な外向きK+電流（ITO）など、さまざまな成功率でいくつかの電流とペースの活動電位（AP）を特定して記録することができます。内向き整流器K+電流（IK1）。さらに、AP記録のIK1を事実上増加させるために、動的電流クランプを適用しました。私たちの研究は、自動化されたパッチクランプ技術を使用して、HIPSC-CMの関連するイオン電流とAPを調査できることを示唆しています。自動化されたパッチクランプとHIPSC-CMテクノロジーの組み合わせは、将来的に幅広いアプリケーションを約束します。
Human induced pluripotent stem cell-derived cardiomyocytes (hiPSC-CMs) have evolved into widely used and reliable cell sources for modeling cardiovascular channelopathies and for drug safety pharmacology. However, the electrophysiological and pharmacological applications of hiPSC-CMs are hampered by manual patch-clamp technique, which is labor-intensive and generates low output. The automated patch-clamp technique is showing potential to overcome this problem. Here, we describe a new dissociation method, with which we can harvest a vast number of single relaxed hiPSC-CMs with smooth membrane suited for automated patch-clamp. Using the automated whole-cell patch-clamp technology, we report a high success rate for cell capture and whole-cell access (around 70%). We are able to identify and record several currents and paced action potentials (APs) with different success rates, including Na+ current (INa), L-type Ca2+ current (ICaL), two specific K+ currents, the transient outward K+ current (Ito) and the inward rectifier K+ current (IK1). Moreover, we successfully applied dynamic current-clamp to virtually increase IK1 for AP recordings. Our study suggests that automated patch-clamp technology could be used to investigate the relevant ionic currents and APs in hiPSC-CMs. The combination of automated patch-clamp and hiPSC-CM technologies promises a wide range of applications in the future.
医師のための臨床サポートサービス
ヒポクラ x マイナビのご紹介
無料会員登録していただくと、さらに便利で効率的な検索が可能になります。