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Forensic science, medicine, and pathology2020Jun01Vol.16issue(2)

高速緑のないサフラニンOは、軟骨後間隔を測定するための軟骨細胞外マトリックスでの高分子の分解をテストするための最良の染色方法です。

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文献タイプ:
  • Journal Article
概要
Abstract

死後間隔(PMI)の測定方法には、異なる組織の細胞と分子の死後変化を監視する方法が含まれています。ヒアリン軟骨の細胞外マトリックス(ECM)における高分子の病理学的分解の速度は、コラーゲンとプロテオグリカン(PG)染色の強度を評価することで検証できます。提示されたin vitroパイロット研究では、この方法論が初めてPMIを決定しました。3人のドナーの骨軟骨サンプルは、11°Cと35°Cで保存され、1日目、12日目、および36日目に分析されました。コラーゲンのためにマッソンのトリクロームとシリウスレッドを使用した染色の強度、およびPGのアルシアンブルーとサフラニンO染料は、修正されたベルングレーディングスケールに応じて10倍推定されました。統計分析は、高速緑色の方法のないサフラニンOが死後36日間で最も適切である(評価者合意0.5541)、時間の影響が温度の影響よりも重要であることを示しました(P = 0.061)ECM高分子の分解について。簡単であり、任意の組織学的研究所で実行できる記載された方法は、多数のドナーで、およびPMI測定の軟骨の高分子染色の強度を評価するための客観的な方法を使用して検証する必要があります。

死後間隔(PMI)の測定方法には、異なる組織の細胞と分子の死後変化を監視する方法が含まれています。ヒアリン軟骨の細胞外マトリックス(ECM)における高分子の病理学的分解の速度は、コラーゲンとプロテオグリカン(PG)染色の強度を評価することで検証できます。提示されたin vitroパイロット研究では、この方法論が初めてPMIを決定しました。3人のドナーの骨軟骨サンプルは、11°Cと35°Cで保存され、1日目、12日目、および36日目に分析されました。コラーゲンのためにマッソンのトリクロームとシリウスレッドを使用した染色の強度、およびPGのアルシアンブルーとサフラニンO染料は、修正されたベルングレーディングスケールに応じて10倍推定されました。統計分析は、高速緑色の方法のないサフラニンOが死後36日間で最も適切である(評価者合意0.5541)、時間の影響が温度の影響よりも重要であることを示しました(P = 0.061)ECM高分子の分解について。簡単であり、任意の組織学的研究所で実行できる記載された方法は、多数のドナーで、およびPMI測定の軟骨の高分子染色の強度を評価するための客観的な方法を使用して検証する必要があります。

Methods for the determination of the postmortem interval (PMI) include methods that monitor the postmortem changes of cells and molecules in different tissues. The rate of pathological degradation of macromolecules in the extracellular matrix (ECM) of hyaline cartilage could be verified by assessing the intensity of collagen and proteoglycan (PG) staining. In the presented in vitro pilot study, this methodology was used for the first time to determine PMI. The osteochondral samples of three donors were stored at 11 °C and 35 °C and analyzed on day 1, day 12, and day 36 postmortem. The intensity of staining using Masson's trichrome and Sirius red for collagen, and Alcian blue and Safranin O dyes for PG was estimated ten times according to the modified Bern grading scale. Statistical analysis showed that the Safranin O without Fast green method is the most appropriate (raters agreement 0.5541) for up to 36 days postmortem, and that the influence of time is more important (p = 0.023) than the influence of temperature (p = 0.061) on the degradation of the ECM macromolecules. The described method, which is simple and can be performed in any histological laboratory, should be verified in corpore conditions, on a large number of donors, and using an objective method for assessing the intensity of cartilage macromolecule staining for PMI determination.

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