マクロファージ発現遺伝子（MPEG）1は、成体ゼブラフィッシュのB細胞の亜集団を識別します

単核食細胞系は、特にマクロファージが体全体に散在する多くの細胞で構成されています。しかし、組織居住マクロファージの不均一性の証拠が増えており、他の造血系統から単核食細胞系サブセットを区別する新しいツールが差し迫った必要性をもたらします。マクロファージ発現遺伝子（MPEG）1.1は、病原体に対する宿主の防御に関連する細孔形成タンパク質であるパーフォリン-2をコードする進化的保存遺伝子です。Zebrafish MPEG1.1：GFPおよびMPEG1.1：MCHERRYレポーターは、特にマクロファージにラベルを付けるために設立されました。それ以来、100を超えるピアレビューされた出版物が、in vivo研究のためにMPEG1.1駆動型トランスジェニックを利用しており、マクロファージの除孔、活性化、および機能の重要な側面に関する新しい洞察を提供しています。MPEG1.1プロモーターのマクロファージ固有の発現パターンは、ゼブラフィッシュ胚でしっかりと確立されていますが、現在、この特異性が成人期まで維持されるかどうかは現在不明です。ここでは、マクロファージに加えて、Bリンパ球の亜集団がほとんどの成人ゼブラフィッシュ臓器のMPEG1.1記者によってマークされているという直接的な証拠を報告します。これらのMPEG1.1+リンパ細胞は内因的にMPEG1.1を発現し、FACを使用して光散乱特性によりMPEG1.1+マクロファージから分離できます。驚くべきことに、我々の分析により、単核菌細胞ではなく、Bリンパ球が、以前にAdulthowの組織存在マクロファージを回収することが報告されたIRF8NULL骨髄式障害のある変異体の主要なMPEG1.1陽性集団を構成することが明らかになりました。注目すべき例外の1つは、哺乳類と同様に、開発とメンテナンスがIRF8から独立していると思われる皮膚マクロファージです。まとめて、我々の発見は、骨髄類のIRF8機能が進化的保存であることを示しており、成人のゼブラフィッシュの単核貪食系を研究するための代替マクロファージ固有のマーカーの必要性を強調しています。

The mononuclear phagocytic system consists of many cells, in particular macrophages, scattered throughout the body. However, there is increasing evidence for the heterogeneity of tissue-resident macrophages, leading to a pressing need for new tools to discriminate mononuclear phagocytic system subsets from other hematopoietic lineages. Macrophage-expressed gene (Mpeg)1.1 is an evolutionary conserved gene encoding perforin-2, a pore-forming protein associated with host defense against pathogens. Zebrafish mpeg1.1:GFP and mpeg1.1:mCherry reporters were originally established to specifically label macrophages. Since then more than 100 peer-reviewed publications have made use of mpeg1.1-driven transgenics for in vivo studies, providing new insights into key aspects of macrophage ontogeny, activation, and function. Whereas the macrophage-specific expression pattern of the mpeg1.1 promoter has been firmly established in the zebrafish embryo, it is currently not known whether this specificity is maintained through adulthood. Here we report direct evidence that beside macrophages, a subpopulation of B-lymphocytes is marked by mpeg1.1 reporters in most adult zebrafish organs. These mpeg1.1+ lymphoid cells endogenously express mpeg1.1 and can be separated from mpeg1.1+ macrophages by virtue of their light-scatter characteristics using FACS. Remarkably, our analyses also revealed that B-lymphocytes, rather than mononuclear phagocytes, constitute the main mpeg1.1-positive population in irf8null myeloid-defective mutants, which were previously reported to recover tissue-resident macrophages in adulthood. One notable exception is skin macrophages, whose development and maintenance appear to be independent from irf8, similar to mammals. Collectively, our findings demonstrate that irf8 functions in myelopoiesis are evolutionary conserved and highlight the need for alternative macrophage-specific markers to study the mononuclear phagocytic system in adult zebrafish.