11を含む三者モチーフはDUSP6と相互作用して、ERK1/2経路を調節することにより、ヒト骨肉腫細胞の成長を促進します

E3ユビキチンリガーゼである11（TRIM11）を含む三者モチーフは、特定のヒトがんを引き起こす発がん性物質として特定されています。ただし、TRIM11の特定の役割は、ヒト骨肉腫（OS）細胞でまだ明らかにされています。OS細胞におけるTRIM11の役割を調査するために、RNA干渉（RNAI）とレンチウイルスベクターを使用して、OS細胞のサイレンシングと過剰発現によりTRIM11が誘導されました。QRT-PCRとウエスタンブロットを使用して、標的遺伝子の転写と翻訳レベルを調べました。細胞カウントキット8（CCK-8）アッセイは、細胞増殖を分析するために確立されました。細胞アポトーシス比は、フローサイトメトリーを介して決定されました。私たちの分析では、TRIM11はアップレギュレートされることが示唆され、OS細胞のプロフィリエーションおよび抗アポトーシス因子として機能しました。さらに、OS細胞におけるTRIM11とERK1/2の関係を調べるために、細胞外シグナル調節キナーゼ1/2（ERK1/2）阻害剤PD98059を使用しました。結果は、TRIM11の役割がERK1/2阻害剤PD98059によって有意に破壊されたことを実証しました。興味深いことに、TRIM11の過剰発現はデュアル特異性ホスファターゼ6（DUSP6）転写に影響を与えないが、OS細胞での翻訳が改善されたことがわかりました。共免疫沈降（CO-IP）分析により、TRIM11がDUSP6と相互作用したことが明らかになりました。重要なことに、TRIM11の過剰発現は、OS細胞におけるDUSP6ユビキチン化を強化しました。したがって、TRIM11は、そのユビキチン化を改善することにより、DUSP6の翻訳を抑制する可能性があります。さらに、OS細胞のTRIM11サイレンシングは、in vivoでの腫瘍形成性を大幅に低下させました。全体として、我々の発見は、最初にTRIM11がOS細胞の成長における癌遺伝子遺伝子であることを明らかにし、OSの治療における標的としての潜在的な機能を示しました。

Tripartite Motif Containing 11 (TRIM11), an E3 ubiquitin ligase, is identified as a carcinogen causing certain human cancers. However, the specific role of TRIM11 is still uncovered in human osteosarcoma (OS) cells. To explore the role of TRIM11 in OS cells, TRIM11 was induced by silencing and overexpression in OS cells using RNA interference (RNAi) and lentiviral vector, respectively. qRT-PCR and western blot were used to examine the transcription and translation levels of the target gene. Cell count kit-8 (CCK-8) assays were established to analyze cell proliferation. Cell apoptosis ratio was determined via flow cytometry. In our analyses, TRIM11 was suggested to be upregulated, and it functioned as a pro-proliferation and antiapoptosis factor in OS cells. Moreover, the extracellular-signal-regulated kinase 1/2 (ERK1/2) inhibitor PD98059 was used to examine the relationship between TRIM11 and ERK1/2 in OS cells. Results demonstrated that the role of TRIM11 was significantly disrupted by the ERK1/2 inhibitor PD98059. Interestingly, we found TRIM11 overexpression did not affect dual-specificity phosphatase 6 (DUSP6) transcription, but improved its translation in OS cells. Co-immunoprecipitation (Co-IP) analyses revealed that TRIM11 interacted with DUSP6. Importantly, overexpression of TRIM11 enhanced DUSP6 ubiquitination in OS cells. Therefore, TRIM11 might suppress the translation of DUSP6 via improving its ubiquitination. Additionally, TRIM11 silencing in OS cells significantly reduced its tumorigenicity in vivo. Overall, our findings firstly revealed that TRIM11 was an oncogene gene in the growth of OS cells and illustrated its potential function as a target in the treatment of OS.