lncRNA Gas5は、STAT3のユビキチン化を促進することにより、Th17分化を阻害し、免疫血小板減少症を緩和します

背景：Tヘルパー17細胞（TH17）の分化の増加は、免疫血小板減少症（ITP）の発生を促進します。これは、制限された治療法を備えた一般的な自己免疫疾患です。最近の研究では、長い非コードRNA（LNCRNA）が自己免疫疾患に重要な役割を果たすことが明らかになっているため、この研究は、ITPのTh17細胞の分化に対するLNCRNA Gas5の効果を調査することを目的としています。 方法：ITP患者の末梢血単核細胞（PBMC）およびITPマウスの脾臓組織におけるGas5の発現は、QRT-PCRによって測定されました。CD4+細胞のTh17細胞の割合は、フローサイトメトリーによって測定されました。Gas5とSTAT3の組み合わせは、RNAプルダウンアッセイとRNA結合タンパク質免疫沈降（RIP）によって確認されました。STAT3のユビキチン化はユビキチン化アッセイによって検出され、STAT3とTRAF6の間の相互作用は共免疫沈降（CO-IP）によって測定されました。最後に、Th17分化に対するGas5の効果は、in vitroおよびin vivoでLentivirus（Lenti）-Gas5を使用して調査されました。 結果：Gas5発現は、ITP患者のPBMCとITPマウスの脾臓組織の両方でダウンレギュレートされました。Gas5の過剰発現は、ナイーブCD4+細胞のTreg分化に影響を与えなかったが、Th17分化を抑制した。RNAプルダウンおよびRNA免疫沈降アッセイにより、Gas5とSTAT3の相互作用が確認されました。さらなる研究では、Gas5がTRAF6を介したユビキチン化を促進することにより、STAT3の分解を加速したことが示されました。Gas5過剰発現は、in vitroでTh17分化を抑制し、STAT3を減らすことによりin vivoでITPを緩和しました。 結論：LNCRNA Gas5は、STAT3のTRAF6を介したユビキチン化を促進することによりTh17分化を阻害し、ITPを緩和しました。

BACKGROUND: The increased differentiation of T helper 17 cells (Th17) accelerates the development of immune thrombocytopenia (ITP), which is a common autoimmune disease with limited therapeutic methods. Recent studies have revealed that long non-coding RNAs (lncRNAs) play a critical role in autoimmune diseases, thus this study aims to investigate the effect of lncRNA GAS5 on the differentiation of Th17 cells in ITP. METHODS: The expression of GAS5 in peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) of ITP patients and spleen tissues of ITP mice was measured by qRT-PCR. The percentage of Th17 cells in CD4+ cells was measured by flow cytometry. The combination between GAS5 and STAT3 was confirmed by RNA pull-down assay and RNA Binding Protein Immunoprecipitation (RIP). The ubiquitination of STAT3 was detected by ubiquitination assay and the interaction between STAT3 and TRAF6 was measured by Co-Immunoprecipitation (Co-IP). Finally, the effect of GAS5 on Th17 differentiation was investigated in vitro and in vivo using lentivirus (lenti)-GAS5. RESULTS: GAS5 expression was downregulated both in PBMCs of ITP patients and spleen tissues of ITP mice. Overexpression of GAS5 suppressed Th17 differentiation while had no effect on Treg differentiation in naïve CD4+ cells. RNA pull-down and RNA immunoprecipitation assays confirmed the interaction between GAS5 and STAT3. Further studies showed GAS5 accelerated the degradation of STAT3 via promoting TRAF6-mediated ubiquitination. Overexpressing GAS5 suppressed Th17 differentiation in vitro and alleviated ITP in vivo via reducing STAT3. CONCLUSION: LncRNA GAS5 inhibited Th17 differentiation through promoting the TRAF6-mediated ubiquitination of STAT3, thus relieving ITP.