オーロラキナーゼ阻害剤トザサルチブは、in vitroおよびin vivoでマスト細胞の活性化を抑制します

背景と目的：マスト細胞はアレルギー反応において重要です。ここでは、マスト細胞の活性化に対する調節効果に関して、抗がん剤トザサル酸の抗アレルギー効果を特異的に評価しました。 実験的アプローチ：マスト細胞脱顆粒に対するトザセル酸効果は、β-ヘキソサミニダーゼおよびヒスタミン放出を測定し、マウス骨髄由来のマスト細胞（BMMC）の形態学的変化をマウス抗ジニトロフェニル（DNP）-Gigeeで刺激したことによって決定されました。/DNP-ヒューマン血清アルブミンまたはヒトLAD2細胞が活性化されましたホルボール-12-ミリステート13-アセテートとカルシウムイオノフォア（PMACI）。NF-κB、MAPK、およびオーロラキナーゼシグナル伝達に関与する分子の発現を検出するために、ウエスタンブロットを実施しました。トザサルチブのin vivo抗アレルギー効果は、マウスIgEを介したパッシブ皮膚アナフィラキシー（PCA）および卵形（OVA）誘発活性全身性アナフィラキシー（ASA）モデルで決定されました。 主な結果：β-ヘキソサミニダーゼまたはヒスタミンレベルで示されるように、トザサルティブ処理は、RBL-2H3細胞およびBMMCまたはLAD2細胞の高親和性IgE受容体（FCεRI）またはPMACI媒介脱顆粒を減少させました。同様に、トザサルチブは、粒子放出やF-アクチンの再編成など、マスト細胞の形態学的変化を防止しました。さらに、トザサルチブは、リン酸化（P）-NF-κBP65、P-ERK1/2、P-P38、およびP-AURORA A/Bの発現を著しく減少させ、トザサルチブがマスト細胞の活性化を媒介するシグナル伝達経路を阻害できることを示しています。トザサルチブは、Evans Blue染色の減少によって示されるように、IgE/Ag誘発PCAを用量依存的に減衰させました。同様に、トザサルチブは、卵子鎖で覆われたASAマウスの体温レベルと血清ヒスタミンレベルを低下させました。 結論と意味：オーロラキナーゼ阻害剤トザサルチブは、in vitroおよびin vivoでマスト細胞の活性化を抑制しました。トザサルティブは、アレルギー性疾患または肥満性症を治療するために、マスト細胞の活性化を標的とする潜在的な薬物である可能性があります。

BACKGROUND AND PURPOSE: Mast cells are important in allergic reactions. Here, we assessed the anti-allergic effects of the anti-cancer drug tozasertib specifically regarding regulatory effects on mast cell activation. EXPERIMENTAL APPROACH: Tozasertib effects on mast cell degranulation were determined by measuring β-hexosaminidase and histamine release and by assessing morphological changes in RBL-2H3 and mouse bone marrow-derived mast cells (BMMCs) stimulated with mouse anti-dinitrophenyl (DNP)-IgE/DNP-human serum albumin or human LAD2 cells activated with phorbol-12-myristate 13-acetate plus calcium ionophore (PMACI). Western blots were performed to detect the expression of molecules involved in NF-κB, MAPK, and Aurora kinase signalling. in vivo anti-allergic effects of tozasertib were determined in the murine IgE-mediated passive cutaneous anaphylaxis (PCA) and ovalbumin (OVA)-induced active systemic anaphylaxis (ASA) models. KEY RESULTS: Tozasertib treatment decreased high-affinity IgE receptor (FcεRI) or PMACI-mediated degranulation in RBL-2H3 cells and in BMMCs or LAD2 cells as shown by β-hexosaminidase or histamine levels. Similarly, tozasertib prevented morphological changes in mast cells, such as particle release and F-actin reorganization. In addition, tozasertib markedly decreased expression of phosphorylated (p)-NF-κB p65, p-Erk1/2, p-p38, and p-Aurora A/B, indicating that tozasertib can inhibit the signalling pathway mediating mast cell activation. Tozasertib attenuated IgE/Ag-induced PCA dose-dependently, as shown by reduced Evans blue staining. Similarly, tozasertib reduced body temperature levels and serum histamine levels in OVA-challenged ASA mice. CONCLUSION AND IMPLICATIONS: The Aurora kinase inhibitor tozasertib suppressed mast cell activation in vitro and in vivo. Tozasertib may be a potential drug, targeting mast cell activation, to treat allergic diseases or mastocytosis.