マイクロシスチンとノドゥラリンの敏感な検出のための不均一な戦略を備えた広範なELISA

New Zealand White rabbittyのためのMC-LR-Keyhole Limpet Hemocyanin（KLH）を使用した9つのミクロシスチン（MCS）とノドゥルリン（NOD）を同時に検出するために、非常に敏感で広く特定の競合間接酵素結合免疫吸着アッセイ（CIELISA）メソッドが開発されました。抗体を産生するための予防接種。MC-LR-BOVINE血清アルブミン（BSA）およびNOD-BSAコーティング抗原を比較し、適切な構造から明らかなように、検出の感度を大幅に改善することが不均一なコーティング戦略を比較しました。MC-LRおよびMC-LR-BSAコーティング技術（0.29 ng/ml）との半症の阻害濃度（IC50）の比較により、NOD-BSAコーティングでは0.054 ng/mlの優れた性能が明らかになりました。NOD-BSAはコーティング抗原として選択されました。これは、0.0016 ng/mLの検出限界（LOD）でMC-LRの検出に対して超高感度を示したため、1 ng/の最大残基レベル（MRL）を下回っていました。ml。さらに、液体クロマトグラフィータンデム質量分析（LC-MS/MS）で検証されているように、高い再現性、良好な安定性、および許容可能なスパイクサンプル検出は、水サンプル中のMCSとNODの分析のためのこの方法の可能な適用を示しました。

A highly sensitive and broadly specific competitive indirect enzyme-linked immunosorbent assay (ciELISA) method was developed for the simultaneous detection of nine microcystins (MCs) and nodularin (NOD) using MC-LR-keyhole limpet hemocyanin (KLH) for New Zealand white rabbit immunization to produce antibodies. The MC-LR-bovine serum albumin (BSA) and NOD-BSA coating antigens were compared and heterogeneous coating strategy was found to significantly improve the sensitivity of detection, as evident from the appropriate structure. Comparison of the half-maximum inhibitory concentration (IC50) with MC-LR and MC-LR-BSA coating techniques (0.29 ng/mL) revealed the superior performance of 0.054 ng/mL for NOD-BSA coating. NOD-BSA was selected as the coating antigen, because it showed ultrahigh sensitivity for the detection of MC-LR with a limit of detection (LOD) of 0.0016 ng/mL, which was below the maximum residue level (MRL) of 1 ng/mL. In addition, high reproducibility, good stability, and acceptable spiked sample detection, as validated by liquid chromatography tandem mass spectrometry (LC-MS/MS), indicated the possible application of this method for the analysis of MCs and NOD in water sample.