抗CD40およびIL-4と組み合わせたIL-21は、抗原特異的記憶B細胞を監視するための強力なポリクローナルB細胞刺激装置を構成します。

免疫モニタリングのための抗原特異的記憶B細胞の検出には、その活性化が必要であり、TLR7/8アゴニストR848およびIL-2での刺激によって一般的に達成されます。この目的のために、IL-21の添加がこのTLR駆動型刺激アプローチをさらに強化するかどうかを評価しました。それはしませんでした。さらに重要なことは、ほとんどの抗原特異的B細胞応答はT細胞駆動型であるため、T細胞のヘルプを密接に模倣するポリクローナルB細胞刺激プロトコルを考案しようとしました。ここでは、アゴニズムの抗CD40、IL-4、およびIL-21の組み合わせにより、インフルエンザ特異的記憶B細胞の検出のためにR848およびIL-2に匹敵するポリクローナルB細胞刺激が得られることを報告します。抗CD40、IL-4、およびIL-21刺激の追加の利点は、IgM+メモリB細胞の選択的活性化と、前者ができないIgE+ ASCの誘発です。これにより、抗原特異的B細胞記憶の免疫モニタリングのために、すべてのIGクラスの誘導を含むヘルパーT細胞を介して生理学的B細胞の活性化を模倣するプロトコルを導入します。

Detection of antigen-specific memory B cells for immune monitoring requires their activation, and is commonly accomplished through stimulation with the TLR7/8 agonist R848 and IL-2. To this end, we evaluated whether addition of IL-21 would further enhance this TLR-driven stimulation approach; which it did not. More importantly, as most antigen-specific B cell responses are T cell-driven, we sought to devise a polyclonal B cell stimulation protocol that closely mimics T cell help. Herein, we report that the combination of agonistic anti-CD40, IL-4 and IL-21 affords polyclonal B cell stimulation that was comparable to R848 and IL-2 for detection of influenza-specific memory B cells. An additional advantage of anti-CD40, IL-4 and IL-21 stimulation is the selective activation of IgM+ memory B cells, as well as the elicitation of IgE+ ASC, which the former fails to do. Thereby, we introduce a protocol that mimics physiological B cell activation through helper T cells, including induction of all Ig classes, for immune monitoring of antigen-specific B cell memory.