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4つのAgrobacterium Tumefaciens株AGL-1、C58C1、EHA105、およびLBA4404株は、Mortierella Alpinaの変換効率に対するひずみタイプの影響についてテストされました。結果は、AGL-1、C58C1、およびEHA105がM. alpinaを正常に変換したことを示しました。その中で、A。tumefacienseha105は、M。alpinaの成功した変換を最初に証明しました。AGL-1とEHA105は4つの株の間で最も高い変換効率を持ち、LBA4404はM. alpinaの変換に失敗しました。4つの株間の形質転換効率の違いにつながる理由は、誘導媒体中の毒性（VIR）遺伝子の転写レベルを決定することにより調査されました。結果は、Vird1、Vird2、Vird4、およびVire1遺伝子の発現がすべての株でアセトシリンゴンによって明らかに誘導され、その転写レベルとAgl-1、C58C1、およびEHA105のViraはLBA4404のそれよりも高いことを示し、高い転写を示唆しています。VIR遺伝子のレベルは、成功した形質転換にとって重要でした。この研究では、M。alpinaの高い形質転換効率を持つA. tumefaciensを選択し、M。alpinaの遺伝的管理を加速します。研究の重要性と影響：オレイギンの糸状菌菌Mortierella Alpinaは、アラキドン酸の生産のための市販の株です。M. alpinaの遺伝操作には、非常に効率的な変換方法が必要です。この研究では、M。alpinaの形質転換効率に対するアグロバクテリウムツメファシエン株の株の効果を調査し、A。tumefaciensを最も高い形質転換効率で選択し、M。alpinaの遺伝操作を加速します。それに加えて、A。tumefaciensの毒性遺伝子の高い転写レベルは、成功するために重要な役割を果たすことが証明されました。
4つのAgrobacterium Tumefaciens株AGL-1、C58C1、EHA105、およびLBA4404株は、Mortierella Alpinaの変換効率に対するひずみタイプの影響についてテストされました。結果は、AGL-1、C58C1、およびEHA105がM. alpinaを正常に変換したことを示しました。その中で、A。tumefacienseha105は、M。alpinaの成功した変換を最初に証明しました。AGL-1とEHA105は4つの株の間で最も高い変換効率を持ち、LBA4404はM. alpinaの変換に失敗しました。4つの株間の形質転換効率の違いにつながる理由は、誘導媒体中の毒性（VIR）遺伝子の転写レベルを決定することにより調査されました。結果は、Vird1、Vird2、Vird4、およびVire1遺伝子の発現がすべての株でアセトシリンゴンによって明らかに誘導され、その転写レベルとAgl-1、C58C1、およびEHA105のViraはLBA4404のそれよりも高いことを示し、高い転写を示唆しています。VIR遺伝子のレベルは、成功した形質転換にとって重要でした。この研究では、M。alpinaの高い形質転換効率を持つA. tumefaciensを選択し、M。alpinaの遺伝的管理を加速します。研究の重要性と影響：オレイギンの糸状菌菌Mortierella Alpinaは、アラキドン酸の生産のための市販の株です。M. alpinaの遺伝操作には、非常に効率的な変換方法が必要です。この研究では、M。alpinaの形質転換効率に対するアグロバクテリウムツメファシエン株の株の効果を調査し、A。tumefaciensを最も高い形質転換効率で選択し、M。alpinaの遺伝操作を加速します。それに加えて、A。tumefaciensの毒性遺伝子の高い転写レベルは、成功するために重要な役割を果たすことが証明されました。
Four Agrobacterium tumefaciens strains AGL-1, C58C1, EHA105 and LBA4404 were tested for the effects of strain types on the transformation efficiency in Mortierella alpina. Results showed that AGL-1, C58C1 and EHA105 transformed M. alpina successfully. Among them, A. tumefaciens EHA105 was first proven successful transformation of M. alpina. AGL-1 and EHA105 had the highest transformation efficiency among the four strains, while LBA4404 failed to transform M. alpina. The reason leading to the transformation efficiency difference among the four strains was explored by determining transcription levels of the virulence (vir) gene in the induction medium. Results showed that the expressions of virD1, virD2, virD4 and virE1 genes were obviously induced by acetosyringone in all the strains, and their transcriptional levels as well as virA's of AGL-1, C58C1 and EHA105 were higher than that of LBA4404, suggesting high transcriptional levels of vir genes were important for successful transformation. The study selected A. tumefaciens with high transformation efficiency of M. alpina, and would accelerate the genetic management of M. alpina. SIGNIFICANCE AND IMPACT OF THE STUDY: Oleaginous filamentous fungus Mortierella alpina is a commercial strain for the production of arachidonic acid. Genetic manipulation of M. alpina requires highly efficient transformation method. In this study, we explore the effect of Agrobacterium tumefaciens strain types on the transformation efficiency of M. alpina and select A. tumefaciens with the highest transformation efficiency, which accelerates the genetic manipulation of M. alpina. Besides, high transcriptional levels of virulence genes in A. tumefaciens were proven to play an important role for successful transformation.
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