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エイコサノイドなどの脂質メディエーターはさまざまな生理学的プロセスを維持しており、その変化は多数の心血管疾患の発症に関与しています。したがって、それらのプロファイルの信頼できる評価は、診断とエイコサノイドバイオマーカーベースの治療に役立つ可能性があります。したがって、提示された研究は、COX-、LOX-、およびCYP450依存経路を介して生成された脂質メディエーターを含む血漿中のアラキドン酸由来のエイコサノイドの定量化のための新しい迅速、特異的、敏感なLC-MS/MS方法を開発および検証することを目的としています。開発された方法は、定量化の下限が0.05から0.50 ng ML-1の範囲であり、それぞれ88.88-111.25％および1.03-11.82％以内の精度と精度が推定されるため、高い感度を特徴としています。サンプル洗浄のための単純で高速の液液抽出手順を適用すると、分析対象物の非常に満足のいく回復が得られました（> 88.30％）。さらに、この方法は、人工血漿を使用して検証されました。これは、研究対象の脂質メディエーターの内因性濃度によって引き起こされるマトリックス効果の除去を可能にするアプローチです。重要なことに、提示されたLC-MS/MSメソッドにより、選択されたエイコサノイドの同時定量的および定性的[Quan/Qual]分析が可能になり、メソッド特異性がさらに改善されました。さらに、検証済みの方法は、ラット、マウス、ヒトの血漿サンプルにおけるエイコサノイドプロファイリングに正常に適用され、それらの種で研究された脂質メディエーターのプロファイルの不均一性を明確に示しています。
エイコサノイドなどの脂質メディエーターはさまざまな生理学的プロセスを維持しており、その変化は多数の心血管疾患の発症に関与しています。したがって、それらのプロファイルの信頼できる評価は、診断とエイコサノイドバイオマーカーベースの治療に役立つ可能性があります。したがって、提示された研究は、COX-、LOX-、およびCYP450依存経路を介して生成された脂質メディエーターを含む血漿中のアラキドン酸由来のエイコサノイドの定量化のための新しい迅速、特異的、敏感なLC-MS/MS方法を開発および検証することを目的としています。開発された方法は、定量化の下限が0.05から0.50 ng ML-1の範囲であり、それぞれ88.88-111.25％および1.03-11.82％以内の精度と精度が推定されるため、高い感度を特徴としています。サンプル洗浄のための単純で高速の液液抽出手順を適用すると、分析対象物の非常に満足のいく回復が得られました（> 88.30％）。さらに、この方法は、人工血漿を使用して検証されました。これは、研究対象の脂質メディエーターの内因性濃度によって引き起こされるマトリックス効果の除去を可能にするアプローチです。重要なことに、提示されたLC-MS/MSメソッドにより、選択されたエイコサノイドの同時定量的および定性的[Quan/Qual]分析が可能になり、メソッド特異性がさらに改善されました。さらに、検証済みの方法は、ラット、マウス、ヒトの血漿サンプルにおけるエイコサノイドプロファイリングに正常に適用され、それらの種で研究された脂質メディエーターのプロファイルの不均一性を明確に示しています。
Lipid mediators such as eicosanoids maintain various physiological processes, and their alterations are involved in the development of numerous cardiovascular diseases. Therefore, the reliable assessment of their profile could be helpful in diagnosis as well as in eicosanoid biomarker-based treatment. Hence, the presented study aimed to develop and validate a new rapid, specific and sensitive LC-MS/MS method for quantification of arachidonic acid-derived eicosanoids in plasma, including lipid mediators generated via COX-, LOX- and CYP450-dependent pathways. The developed method features high sensitivity because the lower limit of quantification ranged from 0.05 to 0.50 ng mL-1 as well as the accuracy and precision estimated within 88.88-111.25% and 1.03-11.82%, respectively. An application of a simple and fast liquid-liquid extraction procedure for sample cleaning resulted in a highly satisfactory recovery of the analytes (>88.30%). Additionally, the method was validated using artificial plasma, an approach that enabled the elimination of the matrix effect caused by an endogenous concentration of studied lipid mediators. Importantly, the presented LC-MS/MS method allowed for simultaneous quantitative and qualitative [quan/qual] analysis of the selected eicosanoids, leading to an additional improvement of the method specificity. Moreover, the validated method was successfully applied for eicosanoid profiling in rat, mouse and human plasma samples, clearly demonstrating the heterogeneity of the profile of studied lipid mediators in those species.
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