イベルメクチンはウシヘルペスウイルス1 DNAポリメラーゼ核輸入を阻害し、ウイルス複製を妨害します

ウシヘルペスウイルス1（BOHV-1）は、主要なウシ病原体です。ウイルス感染を防ぐためにいくつかのワクチンが利用可能であるにもかかわらず、アウトブレイクは頻繁に発生し、世界中で重要な経済的結果を引き起こします。したがって、新しい抗ウイルス薬の開発は非常に望ましいです。これに関連して、ウイルスゲノムの複製は、治療介入の潜在的な標的を表しています。BOHV-1ゲノムは、感染細胞の核で複製が起こるDSDNA分子であり、ウイルスエンコードされたDNAポリメラーゼホロ酵素によって媒介されます。ここでは、細胞内のBOHV-1 DNAポリメラーゼサブユニットの物理的相互作用と細胞内局在を初めて研究しました。共免疫沈降と共焦点レーザー走査顕微鏡（CLSM）実験により、DNAポリメラーゼPul42のプロセス因子が核に自律的に輸送できるのに対し、触媒サブユニットPul30は核に輸送できることを示すことができます。したがって、PUL42ではなくPUL42で推定される古典的なNLS（CNLS）が特定されました。重要なことに、両方のタンパク質が他のウイルスタンパク質がない場合に相互作用する可能性があり、それらの共発現により、細胞核にUL30が蓄積したことです。インポーチンα/β依存性核輸送の阻害剤として最近同定された抗寄生薬であるイベルメクチンによる細胞の治療により、UL42核輸入が減少し、ウイルスの付着が用量依存的にBOHV-1複製を特異的に減少させました。細胞への侵入は影響を受けませんでした。したがって、この研究は、イベルメクチンによるBOHV-1感染に対する抗ウイルス療法の新しい選択肢を提供します。

Bovine herpesvirus1 (BoHV-1) is a major bovine pathogen. Despite several vaccines being available to prevent viral infection, outbreaks are frequent and cause important economic consequences worldwide. The development of new antiviral drugs is therefore highly desirable. In this context, viral genome replication represents a potential target for therapeutic intervention. BoHV-1 genome is a dsDNA molecule whose replication takes place in the nuclei of infected cells and is mediated by a viral encoded DNA polymerase holoenzyme. Here, we studied the physical interaction and subcellular localization of BoHV-1 DNA polymerase subunits in cells for the first time. By means of co-immunoprecipitation and confocal laser scanning microscopy (CLSM) experiments, we could show that the processivity factor of the DNA polymerase pUL42 is capable of being autonomously transported into the nucleus, whereas the catalytic subunit pUL30 is not. Accordingly, a putative classic NLS (cNLS) was identified on pUL42 but not on pUL30. Importantly, both proteins could interact in the absence of other viral proteins and their co-expression resulted in accumulation of UL30 to the cell nucleus. Treatment of cells with Ivermectin, an anti-parasitic drug which has been recently identified as an inhibitor of importin α/β-dependent nuclear transport, reduced UL42 nuclear import and specifically reduced BoHV-1 replication in a dose-dependent manner, while virus attachment and entry into cells were not affected. Therefore, this study provides a new option of antiviral therapy for BoHV-1 infection with Ivermectin.