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はじめに：シトクロム（CYP）エポキシゲナーゼ（CYP2CおよびCYP2J）および可溶性エポキシドヒドロラーゼ（SEH）は、アラキドン酸の代謝に関与しており、腸細胞分化にも潜在的な役割を果たしている可能性があります。腸細胞分化の研究における最初の重要なステップは、適切なin vitroモデルの決定であり、これは生きている生物の条件と可能な限り似ている必要があります。ヒト結腸直腸癌に由来するHT-29およびCACO2細胞株は、適切な培養条件で腸細胞様細胞に分化できることが知られています。 材料と方法：腸細胞様分化の4つの異なるアプローチをテストし、各モデルで最も適切な培養条件を決定しました。その後、未分化および分化細胞におけるCYPエポキシゲナーゼとSEHの発現の変化は、細胞内ELISAによって測定されました。これらの結果は、ヒト胚および胎児の腸のサンプル、ならびに成体十二指腸および結腸のサンプルにおけるCYPエポキシゲナーゼとSEHの発現の免疫組織化学的プロファイルと比較されました。 結果：我々の結果は、酪酸ナトリウム（NABT）促進HT-29細胞と自然分化CACO2細胞がCYPエポキシゲナーゼとSEHプロファイルに似ており、異なるタイプの腸に対応することを示しています。 結論：我々の研究では、腸上皮の分化におけるCYPエポキシゲナーゼの役割とSEH発現の役割の研究に最も適したモデルは、NABT分化HT-29細胞と自然分化したCACO2細胞であることが明らかになりました。
はじめに：シトクロム（CYP）エポキシゲナーゼ（CYP2CおよびCYP2J）および可溶性エポキシドヒドロラーゼ（SEH）は、アラキドン酸の代謝に関与しており、腸細胞分化にも潜在的な役割を果たしている可能性があります。腸細胞分化の研究における最初の重要なステップは、適切なin vitroモデルの決定であり、これは生きている生物の条件と可能な限り似ている必要があります。ヒト結腸直腸癌に由来するHT-29およびCACO2細胞株は、適切な培養条件で腸細胞様細胞に分化できることが知られています。 材料と方法：腸細胞様分化の4つの異なるアプローチをテストし、各モデルで最も適切な培養条件を決定しました。その後、未分化および分化細胞におけるCYPエポキシゲナーゼとSEHの発現の変化は、細胞内ELISAによって測定されました。これらの結果は、ヒト胚および胎児の腸のサンプル、ならびに成体十二指腸および結腸のサンプルにおけるCYPエポキシゲナーゼとSEHの発現の免疫組織化学的プロファイルと比較されました。 結果：我々の結果は、酪酸ナトリウム（NABT）促進HT-29細胞と自然分化CACO2細胞がCYPエポキシゲナーゼとSEHプロファイルに似ており、異なるタイプの腸に対応することを示しています。 結論：我々の研究では、腸上皮の分化におけるCYPエポキシゲナーゼの役割とSEH発現の役割の研究に最も適したモデルは、NABT分化HT-29細胞と自然分化したCACO2細胞であることが明らかになりました。
INTRODUCTION: Cytochrome (CYP) epoxygenases (CYP2C and CYP2J) and soluble epoxide hydrolase (sEH) participate in the metabolism of arachidonic acid and may also have a potential role in enterocyte differentiation. The first critical step in the study of intestinal cell differentiation is the determination of a suitable in vitro model, which must be as similar as possible to the conditions of a living organism. It is known that HT-29 and Caco2 cell lines derived from human colorectal carcinomas can differentiate into enterocyte-like cells in appropriate culture conditions. MATERIAL AND METHODS: We tested 4 different approaches of enterocyte-like differentiation and determined the most appropriate culture conditions for each model. Subsequently, the changes in the expression of CYP epoxygenases and sEH in undifferentiated and differentiated cells were measured by In-Cell ELISA. These results were compared with immunohistochemical profiles of expression of CYP epoxygenases and sEH in samples of human embryonic and fetal intestines as well as adult duodenum and colon. RESULTS: Our results show that sodium butyrate (NaBt)-differentiated HT-29 cells and spontaneously differentiated Caco2 cells resemble CYP epoxygenases and sEH profiles, corresponding with different types of intestines. CONCLUSION: Our study revealed that the most suitable models for the study of the role of CYP epoxygenases and sEH expression in differentiation of intestinal epithelium are NaBt-differentiated HT-29 cells and spontaneously differentiated Caco2 cells.
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