HSA-MIR-141-3pによる神経細胞接着分子1（NCAM1）のアップレギュレーションは、アメル芽細胞腫細胞の移動を抑制します

バックグラウンド神経細胞接着分子1（NCAM1; CD56）とE-カドヘリンはどちらも細胞間接着と細胞の発達プロセスに関与しており、それらの調節不全はさまざまな腫瘍に関連しています。調節不全のNCAM1は、アメロブ芽細胞腫（AB）の侵襲的挙動を抑制する可能性があり、その発現はmiR-141-3pによって調節されると仮定しました。材料と方法リアルタイムQPCRは、AB組織と正常な経口組織（NOM）の間のmiR-141-3p発現の違いを調べるために実行されました。miR-141-3pの潜在的な標的NCAM1は、二重ルシフェラーゼアッセイを介して検証されたバイオインフォマティクス分析によって予測されました。NCAM1のmRNAおよびタンパク質レベルは、それぞれリアルタイムQPCRとウエスタンブロットによって検出されました。さらに、ABにおけるNCAM1の発現と分布は、免疫組織化学染色を介して調査され、E-カドヘリンの免疫組織化学染色も実施されました。NCAM1の過剰発現後、創傷治癒アッセイを使用してAM-1細胞の移動を調べました。結果リアルタイムのQPCRの結果は、miR-141-3pがAB組織で有意にダウンレギュレートされていることを確認しました。バイオインフォマティクスの分析によると、NCAM1はmiR-141-3pの標的であり、デュアルルシフェラーゼアッセイによって確認されました。NCAM1は、mRNAおよびタンパク質レベルのAB組織で有意に上方制御されていることがわかりました。さらに、NCAM1およびE-カドヘリンは、主にABの細胞膜で発現しました。E-カドヘリンのダウンレギュレーションは、AB組織で発見されました。創傷治癒アッセイの結果に示されているように、NCAM1の過剰発現はAM-1細胞の浸潤性を著しく阻害しました。結論この研究では、高度に発現されたNCAM1がABで発見され、AB細胞の移動を抑制し、miR-141-3Pによって調節され、ABの治療標的としての潜在的価値が示唆されました。

BACKGROUND Neural cell adhesion molecule 1 (NCAM1; CD56) and E-cadherin are both involved in cell-cell adhesion and cell development processes, and their dysregulation is associated with various tumors. We hypothesized that dysregulated NCAM1 could suppress the invasive behavior of ameloblastoma (AB), and its expression was regulated by miR-141-3p. MATERIAL AND METHODS Real-time qPCR was performed to examine differences in miR-141-3p expression between AB tissues and normal oral tissues (NOMs). The potential target NCAM1 of miR-141-3p was predicted by bioinformatics analysis, which was validated through dual-luciferase assay. The mRNA and protein levels of NCAM1 were detected by real-time qPCR and Western blot, respectively. Furthermore, the expression and distribution of NCAM1 in AB were investigated through immunohistochemical staining, and immunohistochemical staining of E-cadherin was also performed. After overexpression of NCAM1, the migration of AM-1 cells was examined using wound-healing assay. RESULTS Real-time qPCR results confirmed that miR-141-3p was significantly downregulated in AB tissues. According to bioinformatics analysis, NCAM1 was a target of miR-141-3p, which was confirmed by dual luciferase assay. We found that NCAM1 was significantly upregulated in AB tissues at the mRNA and protein levels. Furthermore, NCAM1 and E-cadherin were mainly expressed on the cell membrane of AB. Downregulation of E-cadherin was found in AB tissues. As shown in wound-healing assay results, NCAM1 overexpression significantly inhibited the invasiveness of AM-1 cells. CONCLUSIONS In this study, highly expressed NCAM1 was found in AB, and it suppressed the migration of AB cells and was regulated by miR-141-3p, suggesting its potential value as a therapeutic target for AB.