アルファライティックプロテアーゼをコードする遺伝子の分子分析：前酵素の証拠

アルファライティックプロテアーゼの構造遺伝子を含む1.7 kbのeCORIフラグメントは、リソバクターエンツィモエゲン495染色体DNAからクローン化されています。この生物からクローン化された遺伝子の最初の例。このセリンプロテアーゼをコードするヌクレオチド配列から推定されたタンパク質配列は、公開されたアミノ酸配列[Olson et al。、Nature 228（1970）438-442]を正確に一致させます。シーケンス分析とS1マッピングは、Subtilisinのように[Wells et al。、Nucleic Acids Res。11（1983）7911-7925]アルファライティックプロテアーゼは、成熟した細胞外型（20 kDa）に処理されるプレプロタンパク質（41 kDa）として合成されます。グラム陰性細菌プロテアーゼにおける大きなN末端プロテアーゼ前駆体のこの最初の発見は、大きな前駆体が細胞外細菌プロテアーゼの一般的な特性である可能性があるという仮説を強化し、前駆細胞セグメントのNまたはC末端の位置が可能であることを示唆しています。重要である。

A 1.7-kb EcoRI fragment containing the structural gene for alpha-lytic protease has been cloned from Lysobacter enzymogenes 495 chromosomal DNA: the first example of a gene cloned from this organism. The protein sequence deduced from the nucleotide sequence encoding this serine protease matches the published amino acid sequence [Olson et al., Nature 228 (1970) 438-442] precisely. Sequence analysis and S1 mapping indicate that, like subtilisin [e.g., Wells et al., Nucleic Acids Res. 11 (1983) 7911-7925] alpha-lytic protease is synthesized as a pre-pro protein (41 kDa) that is subsequently processed to its mature extracellular form (20 kDa). This first finding of a large N-terminal protease precursor in a Gram-negative bacterial protease strengthens the hypothesis that large precursors may be a general property of extracellular bacterial proteases, and suggests that the N- or C-terminal location of the precursor segment may be significant.