エオシン - ニグロシン染色を使用したヒト精子の活力の評価に関する技術ノート

研究の質問：精子の活力の信頼できる評価を行うために、精子とスライドを数える必要があるのはいくつの精子とスライドが必要ですか？現在、さまざまな当局は、少なくとも200個の細胞の数であるが、1つまたは2つのスライドで人間の精子の活力を評価することを推奨しています。 設計：これは、58の射精から作られたエオシン - ニグロシン染色精子の活力スライドを重複する観察研究でした。評価は、スライドあたり2×100および1×200のセルのカウントを使用して行われ、すべて同じ訓練された専門家オブザーバーによって実行されました。 結果：評価では、100未満の200の精子の数に基づいて、1×200以上の2×200に基づく場合、評価はより少ない外れ値の値を示す傾向がありますが、1つのスライドから200の精子をカウントすることは、低スペルマモチリティが生存しているかどうかを示す偶発性精子を確認するための臨床的な目的のために十分な精度を提供します。 結論：2×200の細胞のカウントから得られた結果の精度の増加は、精子の活力が特定の関心のあるエンドポイントである研究研究では重要かもしれませんが、1つの塗抹標本から少なくとも200の精子をカウントすることは、低速度のモチリティを持つ不整合で見られる不整合の精子が見られるかどうかを確立するために十分に正確です。したがって、複製カウントを実行する余分なワークロードと関連する計算は、結果の臨床的価値を高めることはなく、したがって、日常的な精液分析では不要です。適切なスタッフのトレーニングと能力が不可欠です。結論は、推奨されるワンステップのエオシン - ニグロシン技術以外の染色方法には適用されない可能性があります。

RESEARCH QUESTION: How many spermatozoa and slides need to be counted to make a reliable assessment of sperm vitality? Currently, various authorities recommend assessing human sperm vitality on counts of at least 200 cells, but on one or two slides. DESIGN: This was an observational study on duplicate eosin-nigrosin stained sperm vitality slides made from 58 ejaculates. Assessments were made using counts of 2  ×  100 and 1  ×  200 cells per slide, all performed by the same trained expert observer. RESULTS: Although assessments tend to show fewer and smaller outlier values when based on counts of 200 spermatozoa than 100, and on 2  ×  200 than 1  ×  200, counting 200 spermatozoa from one slide provides a result with sufficient accuracy for the clinical purpose of ascertaining whether the immotile spermatozoa in an ejaculate showing low sperm motility are alive or dead. CONCLUSIONS: While the increased accuracy of results derived from counts of 2  ×  200 cells might be important in research studies where sperm vitality is the specific end-point of interest, counting at least 200 spermatozoa from one smear is sufficiently accurate for the clinical purpose of establishing whether the immotile spermatozoa seen in ejaculates with low sperm motility are alive or not. Consequently, the extra workload of performing replicate counts and the associated calculations does not increase the clinical value of the result, and hence is unnecessary in routine semen analysis. Careful laboratory technique as well as proper staff training and competence are essential. The conclusions might not be applicable to staining methods other than the recommended one-step eosin-nigrosin technique.