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ヒトの脳洞型メッシュワークの分節フローは、十分に文書化された現象ですが、単一のドナーから利用可能な組織の量が少ないため、高流量(HF)および低流量(LF)領域の深さの機械的調査が制限されています。この問題に対処するために、複数のペアHFおよびLF細胞株を生成および特徴付けました。ここでは、ペアのHFおよびLF細胞株が単一のドナーから生成されました。細胞は、潜在的な分節領域マーカーの遺伝子とタンパク質の発現だけでなく、成長と増殖のために特徴付けられました。HFおよびLF領域から分離された細胞は、同様の成長と増殖率を持っています。遺伝子発現データは、血管細胞の接着タンパク質1(VCAM1)、トロンボスポンドン2(THBS2)、およびメタロプロテイナーゼ1(TIMP1)の組織阻害剤がin vitroのLF細胞の潜在的なマーカーであることを明らかにしています。VCAM1、THBS2、およびTIMP1のタンパク質発現は複雑であり、TMの動的な性質を反映している可能性があります。これらの遺伝子の初期タンパク質発現レベルは、HF細胞とLF細胞の間で類似している(VCAM1、THBS2)、または一部の株のLFと比較してHFで類似しています(TIMP1)。ただし、長期培養後、LF細胞はHF細胞と比較してより高いレベルのVCAM1、TIMP1、THBS2タンパク質を発現します。HFおよびLF細胞株は、同じ遺伝的背景で複数の実験を可能にするセグメントフローを理解できる強力な新しいツールです。
ヒトの脳洞型メッシュワークの分節フローは、十分に文書化された現象ですが、単一のドナーから利用可能な組織の量が少ないため、高流量(HF)および低流量(LF)領域の深さの機械的調査が制限されています。この問題に対処するために、複数のペアHFおよびLF細胞株を生成および特徴付けました。ここでは、ペアのHFおよびLF細胞株が単一のドナーから生成されました。細胞は、潜在的な分節領域マーカーの遺伝子とタンパク質の発現だけでなく、成長と増殖のために特徴付けられました。HFおよびLF領域から分離された細胞は、同様の成長と増殖率を持っています。遺伝子発現データは、血管細胞の接着タンパク質1(VCAM1)、トロンボスポンドン2(THBS2)、およびメタロプロテイナーゼ1(TIMP1)の組織阻害剤がin vitroのLF細胞の潜在的なマーカーであることを明らかにしています。VCAM1、THBS2、およびTIMP1のタンパク質発現は複雑であり、TMの動的な性質を反映している可能性があります。これらの遺伝子の初期タンパク質発現レベルは、HF細胞とLF細胞の間で類似している(VCAM1、THBS2)、または一部の株のLFと比較してHFで類似しています(TIMP1)。ただし、長期培養後、LF細胞はHF細胞と比較してより高いレベルのVCAM1、TIMP1、THBS2タンパク質を発現します。HFおよびLF細胞株は、同じ遺伝的背景で複数の実験を可能にするセグメントフローを理解できる強力な新しいツールです。
Segmental flow in the human trabecular meshwork is a well-documented phenomenon but in depth mechanistic investigations of high flow (HF) and low flow (LF) regions are restricted due to the small amount of tissue available from a single donor. To address this issue we have generated and characterized multiple paired HF and LF cell strains. Here paired HF and LF cell strains were generated from single donors. Cells were characterized for growth and proliferation, as well as gene and protein expression of potential segmental region markers. Cells isolated from HF and LF regions have similar growth and proliferation rates. Gene expression data reveals vascular cell adhesion protein 1 (VCAM1), thrombospondin 2 (THBS2), and tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (TIMP1) are potential markers of LF cells in vitro. Protein expression of VCAM1, THBS2 and TIMP1 are complex and may reflect the dynamic nature of the TM. Initial protein expression levels of these genes is either similar between HF and LF cells (VCAM1, THBS2), or higher in HF compared to LF in some strains (TIMP1). However, after long term culture LF cells express higher levels of VCAM1, TIMP1 and THBS2 protein compared to HF cells. HF and LF cell strains are a powerful new tool that enable understanding segmental flow allowing for multiple experiments on the same genetic background.
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