HIV共感染患者の胸膜結核を診断するための胸水単核細胞のマイコバクテリア抗原

背景：結核の余分な肺症状（TB）は、胸膜結核が2番目に一般的な場所として、HIV感染者のTB症例の約半分を占めています。マイコバクテリアは除去されていますが、マイコバクテリア抗原は感染した組織に持続し、炎症と慢性を引き起こす可能性があります。この研究の目的は、胸水におけるさまざまなマイコバクテリア抗原、抗原の存在に対するHIV感染とCD4+ T細胞の枯渇の影響、および胸膜結核の改善および迅速な診断のための抗原の診断可能性を調査することでした。 方法：胸膜液標本は、臨床的に疑われる胸水を呈した患者から収集され、培養、サイトロジー、およびアデノシンデアミナーゼ活性分析のために定期的に処理されました。HIVステータスとCD4+ T細胞数が記録されました。胸膜液単核細胞（PFMC）を分離し、細胞塗抹標本をさまざまなマイコバクテリア抗原の酸酸染色および免疫細胞化学で染色しました。リアルタイムとネストされたPCRが実行されました。患者は、複合参照標準を使用して、胸膜結核または非TB症例に分類されました。診断検査としてのマイコバクテリア抗原のパフォーマンスが評価されました。 結果：合計41人の患者が登録され、そのうち32人が胸膜結核として、9人が非TBに分類されました。13人の患者に培養が確認され、26人（81％）がHIV-TB共感染であり、64％が<100 CD4+ T細胞/ミクロールを持っていました。分泌された分泌および細胞壁のマイコバクテリア抗原は、PFMCで検出されました。リポアラビノマンナン（LAM）は、最も頻繁に検出される抗原でした。肯定的な培養と抗原の間に直接的な相関はありませんでした。CD4+ T細胞数が低い症例は、細菌および抗原の負担が高かった。分泌された抗原またはLAMの検出を組み合わせることにより、胸膜結核を診断する感度と特異性は、それぞれ56％と78％でしたが、培養では41および100％、ネストされたPCRで53と89％、リアルタイムPCRで6および100％でした。 結論：マイコバクテリア抗原は、生存可能なマイコバクテリアまたは細菌DNAが常に検出されなかった場合でも、結核性胸水からPFMCで検出可能でした。したがって、免疫細胞化学による分泌された抗原とLAM検出の組み合わせは、酸性染色を補完し、胸膜結核の迅速かつ正確な診断に寄与する可能性があります。

BACKGROUND: Extra pulmonary manifestation of tuberculosis (TB) accounts for approximately one-half of TB cases in HIV-infected individuals with pleural TB as the second most common location. Even though mycobacteria are cleared, mycobacterial antigens may persist in infected tissues, causing sustained inflammation and chronicity of the disease. The aim of this study was to explore various mycobacterial antigens in pleural effusions, the impact of HIV infection and CD4+ T-cell depletion on the presence of antigens, and the diagnostic potential of antigens for improved and rapid diagnosis of pleural TB. METHODS: Pleural fluid specimens were collected from patients presenting with clinically suspected pleural TB, and processed routinely for culture, cytology, and adenosine deaminase activity analysis. HIV status and CD4+ T-cell counts were recorded. Pleural fluid mononuclear cells (PFMC) were isolated, and cell smears were stained with acid-fast staining and immunocytochemistry for various mycobacterial antigens. Real-time and nested-PCR were performed. Patients were categorized as pleural TB or non-TB cases using a composite reference standard. Performance of the mycobacterial antigens as diagnostic test was assessed. RESULTS: A total of 41 patients were enrolled, of which 32 were classified as pleural TB and 9 as non-TB. Thirteen patients had culture confirmed pleural TB, 26 (81%) were HIV-TB co-infected, and 64% had < 100 CD4+ T-cells/microL. Both secreted and cell-wall mycobacterial antigens were detected in PFMC. Lipoarabinomannan (LAM) was the most frequently detected antigen. There was no direct correlation between positive culture and antigens. Cases with low CD4+ T-cell counts had higher bacterial and antigen burden. By combining detection of secreted antigen or LAM, the sensitivity and specificity to diagnose pleural TB was 56 and 78%, respectively, as compared to 41 and 100% for culture, 53 and 89% for nested PCR, and 6 and 100% for real-time PCR. CONCLUSION: Mycobacterial antigens were detectable in PFMC from tuberculous pleural effusions, even in cases where viable mycobacteria or bacterial DNA were not always detected. Thus, a combination of secreted antigen and LAM detection by immunocytochemistry may be a complement to acid-fast staining and contribute to rapid and accurate diagnosis of pleural TB.