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Scientific reports2020Jul01Vol.10issue(1)

アプタマーの共役磁気ナノ粒子を使用したグリケートされたアルブミン沈殿

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文献タイプ:
  • Journal Article
  • Research Support, Non-U.S. Gov't
概要
Abstract

プレフィブリルアミロイド凝集体の除去のための戦略を開発するために、MNP(AP-SIMNP)で共役するアプタマーを達成するために、シリカコーティングされた磁気ナノ粒子の3段階の非修飾DNAアプタマーの結合を実施しました。プレミブリルアミロイド凝集体は、糖尿病症状の下で生成され、糖尿病性合併症の発生に顕著に関与しています。血清アルブミンプレチドリルアミロイド凝集体(AA20)に対する候補DNAアプタマーの結合特性は、電気泳動移動シフトアッセイ(EMSA)および表面プラズモン共鳴分光法(SPR)分析を使用して検証されました。クロロ機能化されたシリカでコーティングされたMNPを合成し、MNP(AP-SIMNP)で共役するアプタマーとしてナノターゲティング構造を構築しました。最後に、AP-SIMNPは、外部磁場を使用して、特定の結合効率とAA20除去について検証されました。候補者は、EMSAおよびSPR分析で高い結合能力を示し(KD = 3.4×10〜9 m)、AP-SIMNPの構築に正常に使用されました。ここでは、AP-SIMNPとして効率的なバイオスカベンジャーの概念実証を示して、有毒なAA20種の特定の結合/除去を通じて、いくつかの糖尿病合併症を克服するための可能な戦略として考慮する有望な機会を提供します。

プレフィブリルアミロイド凝集体の除去のための戦略を開発するために、MNP(AP-SIMNP)で共役するアプタマーを達成するために、シリカコーティングされた磁気ナノ粒子の3段階の非修飾DNAアプタマーの結合を実施しました。プレミブリルアミロイド凝集体は、糖尿病症状の下で生成され、糖尿病性合併症の発生に顕著に関与しています。血清アルブミンプレチドリルアミロイド凝集体(AA20)に対する候補DNAアプタマーの結合特性は、電気泳動移動シフトアッセイ(EMSA)および表面プラズモン共鳴分光法(SPR)分析を使用して検証されました。クロロ機能化されたシリカでコーティングされたMNPを合成し、MNP(AP-SIMNP)で共役するアプタマーとしてナノターゲティング構造を構築しました。最後に、AP-SIMNPは、外部磁場を使用して、特定の結合効率とAA20除去について検証されました。候補者は、EMSAおよびSPR分析で高い結合能力を示し(KD = 3.4×10〜9 m)、AP-SIMNPの構築に正常に使用されました。ここでは、AP-SIMNPとして効率的なバイオスカベンジャーの概念実証を示して、有毒なAA20種の特定の結合/除去を通じて、いくつかの糖尿病合併症を克服するための可能な戦略として考慮する有望な機会を提供します。

To develop a strategy for the elimination of prefibrillar amyloid aggregates, a three-step non-modified DNA aptamer conjugation on silica-coated magnetic nanoparticles was carried out to achieve aptamer conjugated on MNP (Ap-SiMNP). Prefibrillar amyloid aggregates are generated under a diabetic condition which are prominently participated in developing diabetic complications. The binding properties of candidate DNA aptamer against serum albumin prefibrillar amyloid aggregates (AA20) were verified using electrophoretic mobility shift assay (EMSA) and surface plasmon resonance spectroscopy (SPR) analysis. The chloro-functionalized silica-coated MNPs were synthesized then a nano-targeting structure as aptamer conjugated on MNP (Ap-SiMNP) was constructed. Finally, Ap-SiMNP was verified for specific binding efficiency and AA20 removal using an external magnetic field. The candidate aptamer showed a high binding capacity at EMSA and SPR analysis (KD = 3.4 × 10─9 M) and successfully used to construct Ap-SiMNP. Here, we show a proof of concept for an efficient bio-scavenger as Ap-SiMNP to provide a promising opportunity to consider as a possible strategy to overcome some diabetic complications through specific binding/removal of toxic AA20 species.

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