アニサキスシンプレックス製品は、分化したCACO-2細胞における腸上皮バリア機能とオクルディンおよびゾーンオクルデン-1局在の局在化を損なう

背景：Anisakis spp。幅広い海洋生物に含まれる線虫の寄生虫です。人間は誤って感染する可能性があり、アニサキ症の症状とアレルギー反応を示します。A.シンプレックス感染被験者の腸透過性の増加と、漁業製品が食事に再導入された場合、一部のアレルギー患者の特定のIgE力価が増加するという証拠があります。この研究の目的は、CACO-2細胞単層を使用して、腸の完全性と透過性に対するA.シンプレックス粗抽出物の効果を研究することでした。Ani S 4アレルゲンの能力を分析して、上皮バリアを通過します。 方法論/主要な調査結果：細胞の生物エネルギー、鎖骨耐性耐性、生存率、透過性、反応性酸素種生成、およびタイト接合タンパク質の免疫蛍光染色を分析しました。A.シンプレックス粗抽出物は、用量依存的にCACO-2細胞単層の完全性を危険にさらします。この効果は1時間の培養で検出され、24時間の培養後に完全性が回復します。上皮バリアの破壊には、傍細胞透過性と反応性酸素種の産生の増加と、オクルディンおよびZonula Occludens-1の非局在化が伴います。最後に、シスタチン活性を伴う消化アレルゲンに対して熱安定性があり耐性であるANI S 4は、CACO-2単層の上皮バリアを通過し、24時間の培養後の基底外側濃度の総濃度の22.7％の累積平均平均パーセンテージに達することができます。 結論/重要性：我々の結果は、A.シンプレックスがCACO-2細胞単層の完全性と透過性の早期かつ可逆的な変化を誘導し、この効果の根本的なメカニズムが上皮密着接合部の酸化ストレスと破壊を伴うことを示しています。さらに、Ani S 4アレルゲンが上皮バリアを通過できることが示されています。これらの発見は、アニサキス感染患者で観察された腸透過性の増加、A。シンプレックスアレルゲンに対するIgE感作の経時的な変化、およびアニサキスアレルギーにおける特定のIgE持続性を説明することができます。

BACKGROUND: Anisakis spp. are nematode parasites found in a wide range of marine organisms. Human beings may accidentally become infected, showing the symptoms of anisakiasis and allergic responses. There has been evidence of increased intestinal permeability in A. simplex-sensitized subjects and that specific IgE titres increase in some allergic patients when fishery products are re-introduced into their diet. The aims of this work were to study the effect of A. simplex crude extract on the intestinal integrity and permeability by using Caco-2 cell monolayer. To analyse the capacity of Ani s 4 allergen to cross the epithelial barrier. METHODOLOGY/PRINCIPAL FINDINGS: Cellular bioenergetics, transepithelial electrical resistance, viability, permeability, reactive oxygen species generation and immunofluorescent staining of tight junction proteins were analysed. A. simplex crude extract compromises the Caco-2 cell monolayer integrity in a dose-dependent manner. This effect is detected at 1 hour of culture and integrity is recovered after 24 hours of culture. The epithelial barrier disruption is accompanied by an increase in paracellular permeability and reactive oxygen species production and by a delocalization of occludin and zonula occludens-1. Finally, Ani s 4, a thermostable and resistant to digestion allergen with cystatin activity, is able to cross the epithelial barrier in Caco-2 monolayer and reach a cumulative mean percentage of 22.7% of total concentration in the basolateral side after 24 hours of culture. CONCLUSIONS/SIGNIFICANCE: Our results demonstrate that A. simplex induces an early and reversible alteration of integrity and permeability of Caco-2 cell monolayer and that an underlying mechanism of this effect would involve the oxidative stress and disruption of epithelial tight junctions. Additionally, it has been shown that Ani s 4 allergen is able to cross the epithelial barrier. These findings could explain the increased intestinal permeability observed in Anisakis-sensitized patients, the changes over time in IgE sensitization to A. simplex allergens, and the specific IgE persistence in Anisakis allergy.