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Journal of virological methods2020Oct01Vol.284issue()

血清学的抗原としての組換えエプスタインバーウイルス糖タンパク質350

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文献タイプ:
  • Journal Article
  • Research Support, Non-U.S. Gov't
概要
Abstract

エプスタインバーウイルス(EBV)糖タンパク質350(GP350)は、中和抗体の主要な標的であり、Bリンパ球へのビリオン付着にも不可欠であるEBVエンベロープで発現する最も豊富な糖タンパク質です。いくつかの研究では、EBV GP350をワクチン候補として扱っていますが、血清学的アッセイの潜在的な抗原としてはあまり一般的ではありません。現在の研究の目的は、EBVに感染した個人のEBV GP350特異的IgGを定量化する診断ツールを開発することでした。EBV GP350(アミノ酸(AA)1-860)の細胞外ドメインをコードするコンストラクトが、中国のハムスター卵巣細胞で発現のために開発されました。ウイルスカプシド抗原(VCA)およびエプスタインバー核抗原1(EBNA1)に対する既知のIgGセロスタスを伴う血清サンプル(n = 360)は、セロスタトゥスの違いに基づいて3つのグループに分割されました:VCA+ EBNA1+(n = 120)、VCA+EBNA1-(n = 120)およびVCA-EBNA1-(n = 120)。サンプルは、組換えEBV GP350 AA 1-860を抗原として使用して、間接ELISAによって分析されました。120 VCA+ EBNA1+サンプルのうち108個の明確な過半数が、検出可能なEBV GP350特異的IgGでした。120 VCA+EBNA1-サンプルのうち、79は検出可能なEBV GP350特異的IgGでした。120のVCA-EBNA1-サンプルのうち2つのみが検出可能なEBV GP350特異的IgGを持っていました。ここで報告されている結果は、EBV GP350 AA 1-860 ELISAの使用が血清サンプルでのEBV固有のIgG検出の敏感な方法として機能することを示しています。

エプスタインバーウイルス(EBV)糖タンパク質350(GP350)は、中和抗体の主要な標的であり、Bリンパ球へのビリオン付着にも不可欠であるEBVエンベロープで発現する最も豊富な糖タンパク質です。いくつかの研究では、EBV GP350をワクチン候補として扱っていますが、血清学的アッセイの潜在的な抗原としてはあまり一般的ではありません。現在の研究の目的は、EBVに感染した個人のEBV GP350特異的IgGを定量化する診断ツールを開発することでした。EBV GP350(アミノ酸(AA)1-860)の細胞外ドメインをコードするコンストラクトが、中国のハムスター卵巣細胞で発現のために開発されました。ウイルスカプシド抗原(VCA)およびエプスタインバー核抗原1(EBNA1)に対する既知のIgGセロスタスを伴う血清サンプル(n = 360)は、セロスタトゥスの違いに基づいて3つのグループに分割されました:VCA+ EBNA1+(n = 120)、VCA+EBNA1-(n = 120)およびVCA-EBNA1-(n = 120)。サンプルは、組換えEBV GP350 AA 1-860を抗原として使用して、間接ELISAによって分析されました。120 VCA+ EBNA1+サンプルのうち108個の明確な過半数が、検出可能なEBV GP350特異的IgGでした。120 VCA+EBNA1-サンプルのうち、79は検出可能なEBV GP350特異的IgGでした。120のVCA-EBNA1-サンプルのうち2つのみが検出可能なEBV GP350特異的IgGを持っていました。ここで報告されている結果は、EBV GP350 AA 1-860 ELISAの使用が血清サンプルでのEBV固有のIgG検出の敏感な方法として機能することを示しています。

Epstein-Barr virus (EBV) glycoprotein 350 (gp350) is the most abundant glycoprotein expressed on the EBV envelope, the major target for neutralizing antibodies and also essential for virion attachment to B lymphocytes. Several studies have addressed EBV gp350 as a vaccine candidate, but less commonly as a potential antigen for serological assays. The aim of the current study was to develop a diagnostic tool to quantify EBV gp350-specific IgG in previously EBV-infected individuals. A construct encoding the extracellular domain of EBV gp350 (amino acid (aa) 1-860) was developed for expression in Chinese hamster ovary cells. Serum samples (n = 360) with known IgG serostatus against viral capsid antigen (VCA) and Epstein-Barr nuclear antigen 1 (EBNA1) were divided into three groups based on the differences in their serostatus: VCA + EBNA1+ (n = 120), VCA + EBNA1- (n = 120) and VCA-EBNA1- (n = 120). The samples were analyzed by indirect ELISA using recombinant EBV gp350 aa 1-860 as antigen. A clear majority, 108 of the 120 VCA + EBNA1+ samples, had detectable EBV gp350-specific IgG. Of the 120 VCA + EBNA1- samples, 79 had detectable EBV gp350-specific IgG. Only 2 of the 120 VCA-EBNA1- samples had detectable EBV gp350-specific IgG. The results reported here show that use of the EBV gp350 aa 1-860 ELISA can serve as a sensitive method for EBV-specific IgG detection in serum samples.

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