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背景：ヒト全体の角膜を使用したヘルペス角膜炎（HK）モデルは、種の特異性が高く、細胞培養が繁殖できない角膜細胞集団間の相互作用の役割のために、ウイルス宿主関係を研究するために不可欠です。それにもかかわらず、2つの現在の角膜貯蔵方法（低体温および臓器培養（OC））は、上皮摩耗、間質浮腫、および過剰な内皮死亡率を特徴とするため、角膜を良好な生理学的状態に保存しません。 方法：科学的使用を目的としたヒト角膜をリハビリするために、角膜の恒常性に不可欠な2つの生理学的パラメーターを回復するアクティブストレージマシン（ASM）を使用しました：眼圧と貯蔵媒体更新（それぞれ21mmHgおよび2.6μl/min）。ASMストレージは、2週間で通常の多層上皮を再生します。上皮に単純ヘルペスウイルス1（HSV-1）を接種することにより、移植に適さない6組の角膜に感染し、従来のOC法を使用して同じ培地に保存された他の角膜と各ASM貯蔵角膜を比較しました。 結果：ASMの角膜のみが樹状突起（n = 3）または地理的（n = 2）上皮潰瘍を生成し、典型的なHSV-1誘発性臨床病変を生成しました。OCの角膜は、広範囲にわたる絶滅のみを示しました。感染していないコントロールはいずれも上皮損傷を示しませんでした。角膜組織の組織学、免疫組織化学、透過電子顕微鏡、およびポリメラーゼ連鎖反応は、すべての場合における感染を確認した（陰性対照を除く）。 結論：ASMは、典型的な上皮病変を再現するヒト角膜全体におけるHKの革新的なex vivoモデルを提供します。
背景：ヒト全体の角膜を使用したヘルペス角膜炎（HK）モデルは、種の特異性が高く、細胞培養が繁殖できない角膜細胞集団間の相互作用の役割のために、ウイルス宿主関係を研究するために不可欠です。それにもかかわらず、2つの現在の角膜貯蔵方法（低体温および臓器培養（OC））は、上皮摩耗、間質浮腫、および過剰な内皮死亡率を特徴とするため、角膜を良好な生理学的状態に保存しません。 方法：科学的使用を目的としたヒト角膜をリハビリするために、角膜の恒常性に不可欠な2つの生理学的パラメーターを回復するアクティブストレージマシン（ASM）を使用しました：眼圧と貯蔵媒体更新（それぞれ21mmHgおよび2.6μl/min）。ASMストレージは、2週間で通常の多層上皮を再生します。上皮に単純ヘルペスウイルス1（HSV-1）を接種することにより、移植に適さない6組の角膜に感染し、従来のOC法を使用して同じ培地に保存された他の角膜と各ASM貯蔵角膜を比較しました。 結果：ASMの角膜のみが樹状突起（n = 3）または地理的（n = 2）上皮潰瘍を生成し、典型的なHSV-1誘発性臨床病変を生成しました。OCの角膜は、広範囲にわたる絶滅のみを示しました。感染していないコントロールはいずれも上皮損傷を示しませんでした。角膜組織の組織学、免疫組織化学、透過電子顕微鏡、およびポリメラーゼ連鎖反応は、すべての場合における感染を確認した（陰性対照を除く）。 結論：ASMは、典型的な上皮病変を再現するヒト角膜全体におけるHKの革新的なex vivoモデルを提供します。
BACKGROUND: Herpetic keratitis (HK) models using whole human corneas are essential for studying virus-host relationships, because of high species specificity and the role of interactions between corneal cell populations that cell culture cannot reproduce. Nevertheless, the two current corneal storage methods (hypothermia and organ culture (OC)) do not preserve corneas in good physiological condition, as they are characterized by epithelial abrasion, stromal oedema, and excessive endothelial mortality. METHODS: To rehabilitate human corneas intended for scientific use, we used an active storage machine (ASM) that restores two physiological parameters that are essential for corneal homeostasis: intraocular pressure and storage medium renewal (21mmHg and 2.6 μL/min, respectively). ASM storage regenerates a normal multilayer epithelium in 2 weeks. We infected six pairs of corneas unsuitable for graft by inoculating the epithelium with herpes simplex virus type 1 (HSV-1), and compared each ASM-stored cornea with the other cornea stored in the same medium using the conventional OC method. RESULTS: Only corneas in the ASM developed a dendritic (n = 3) or geographic (n = 2) epithelial ulcer reproducing typical HSV-1-induced clinical lesions. Corneas in OC showed only extensive desquamations. None of the uninfected controls showed epithelial damage. Histology, immunohistochemistry, transmission electron microscopy and polymerase chain reaction on corneal tissue confirmed infection in all cases (excluding negative controls). CONCLUSIONS: The ASM provides an innovative ex vivo model of HK in whole human cornea that reproduces typical epithelial lesions.
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