tRNA由来のフラグメント（TRF-3001B）は、オートファジーを阻害することにより、非アルコール性脂肪肝疾患の発生を悪化させます

目的：非アルコール性脂肪肝疾患（NAFLD）は、世界中の健康問題の高まりです。障害のあるオートファジーは、NAFLDの病因に関連しています。トランスファーRNA（TRNA）由来のフラグメント（TRF）がオートファジーを介してNAFLDの進行を調節するかどうかは明らかではありません。ここでは、オートファジーまたは脂肪生成関連TRFを特定し、NAFLDでの役割を調査することを目指しました。 方法：NAFLDおよびコントロールマウスで小さなRNA配列決定を実施し、候補TRFは定量的逆転写PCR（QRT-PCR）を使用して検証されました。キーTRFの役割は、オイルレッドO染色、ウエスタンブロッティング、QRT-PCR、およびルシフェラーゼレポーターアッセイを使用して調査されました。 重要な調査結果：NAFLDマウスでは、p62の発現が増加し、LC3B-II/LC3-Iの比率がコントロールマウスと比較して減少しました。9つの差次的に発現したTRFを特定しましたが、その中には、TRF-3001Bが対照肝組織と比較してNAFLDマウスで有意に上方制御されることがわかりました。FA脂肪酸でオートファジーは減少しました）誘発LO2細胞が、TRF-3001Bのサイレンシングはオートファジーの減少と脂質形成の増加を大幅に廃止しました。さらに、クロロキン（CQ）は、脂質形成に対するTRF-3001B阻害の効果を劇的に廃止しました。機械的には、TRF-3001Bはオートファジー関連の遺伝子PRKAA1の発現を標的と阻害しました。in vivoでは、TRF-3001BサイレンシングはNAFLDマウスのトリグリセリドとコレステロールのレベルを大幅に改善し、CQがTRF-3001B欠乏の効果を劇的に廃止しました。 重要性：TRF-3001Bは、PRKAA1をターゲットとすることによりオートファジーを阻害することにより、NAFLDの発生を悪化させる可能性があります。

AIM: Nonalcoholic fatty liver disease (NAFLD) is a growing health problem worldwide. Impaired autophagy has been linked to NAFLD pathogenesis. Whether transfer RNA (tRNA)-derived fragments (tRFs) regulate the progression of NAFLD via autophagy is not clear. Here, we aimed to identify autophagy- or adipogenesis-related tRFs and investigate their roles in NAFLD. METHODS: Small RNA sequencing was performed on NAFLD and control mice, and candidate tRFs were validated using quantitative reverse transcription PCR (qRT-PCR). The role of a key tRF was investigated using Oil red O staining, western blotting, qRT-PCR and a luciferase reporter assay. KEY FINDINGS: In NAFLD mice, the expression of p62 was increased and the ratio of LC3B-II/LC3-I was decreased compared to control mice. We identified nine differentially expressed tRFs, among which tRF-3001b was found to be significantly upregulated in NAFLD mice compared to the control liver tissues. Autophagy was decreased in FA （fatty acids)-induced LO2 cells, while silencing of tRF-3001b significantly abrogated the decrease in autophagy and increase in lipid formation. Moreover, chloroquine (CQ) dramatically abrogated the effect of tRF-3001b inhibition on lipid formation. Mechanistically, tRF-3001b targeted and inhibited the expression of the autophagy-related gene Prkaa1. In vivo, tRF-3001b silencing significantly improved pathology and decreased the levels of triglycerides and cholesterol in NAFLD mice, while CQ dramatically abrogated the effect of tRF-3001b deficiency. SIGNIFICANCE: tRF-3001b may aggravate the development of NAFLD by inhibiting autophagy via targeting Prkaa1.