Oropouche Virus感染、RNA PrimeFlow™およびQRT-PCRアッセイで特定されたヒト末梢血単核細胞のIFN応答は持続し、誘導します

Oropouche Orthobunyavirus（OROV）は、アメリカでの普及の可能性が高い新興のアルボウイルスです。ヒトのOROV感染中の末梢血単核細胞（PBMC）応答の役割についてはほとんど知られていない。したがって、OROV感染中のヒト白血球感受性、許容性、免疫応答を評価するために、RNAハイブリダイゼーション、QRT-PCR、および細胞ベースのアッセイを適用して、異なる細胞でウイルス抗原、ゲノム、抗原、遺伝子発現を定量化しました。最初に、THP-1単球、Jeko-1 B細胞、およびJurkat T細胞として、ヒト白血球系統のOroV複製を観察しました。興味深いことに、連続した通路の後でも、これらの細胞では細胞生存率とウイルス粒子検出が維持されます。健康なドナーからのPBMCは感受性がありましたが、感染した粒子も感染したPBMCの上清で発見されなかったため、感染は生産的ではありませんでした。実際、リンパ球、単球、CD11C+細胞の24 HPIでウイルス抗原と少量のOROVゲノムのみが検出されました。最後に、インターフェロン（IFN）応答の活性化は、ヒトPBMCのOROV複製を制限するために不可欠でした。I/III型IFN、ISGおよび炎症性サイトカインの発現の増加は、最初の24 HPIで検出され、ウイルス複製はIFNARをブロックしたり、グルココルチコイドで細胞を処理した後に再確立されました。したがって、要するに、我々の結果は、感染後の効果的なIFN応答の結果として、OROVがヒトT細胞、単球、DCS、B細胞に感染して低価格にとどまることができることを示しています。免疫抑制中の特定の微小環境で。

Oropouche orthobunyavirus (OROV) is an emerging arbovirus with a high potential of dissemination in America. Little is known about the role of peripheral blood mononuclear cells (PBMC) response during OROV infection in humans. Thus, to evaluate human leukocytes susceptibility, permissiveness and immune response during OROV infection, we applied RNA hybridization, qRT-PCR and cell-based assays to quantify viral antigens, genome, antigenome and gene expression in different cells. First, we observed OROV replication in human leukocytes lineages as THP-1 monocytes, Jeko-1 B cells and Jurkat T cells. Interestingly, cell viability and viral particle detection are maintained in these cells, even after successive passages. PBMCs from healthy donors were susceptible but the infection was not productive, since neither antigenome nor infectious particle was found in the supernatant of infected PBMCs. In fact, only viral antigens and small quantities of OROV genome were detected at 24 hpi in lymphocytes, monocytes and CD11c+ cells. Finally, activation of the Interferon (IFN) response was essential to restrict OROV replication in human PBMCs. Increased expression of type I/III IFNs, ISGs and inflammatory cytokines was detected in the first 24 hpi and viral replication was re-established after blocking IFNAR or treating cells with glucocorticoid. Thus, in short, our results show OROV is able to infect and remain in low titers in human T cells, monocytes, DCs and B cells as a consequence of an effective IFN response after infection, indicating the possibility of leukocytes serving as a trojan horse in specific microenvironments during immunosuppression.