VWF D'D3およびD4ドメインの変異に関連する非標準型2Bフォンウィルブランド疾患

粘膜と皮膚の出血を呈した55歳のイタリア人男性を観察しました。彼の血液分析の結果は、VONウィルブランド因子（VWF）抗原とVWF活性の低レベルを示しました（VWFリストセケチン補因子とVWFコラーゲン結合の両方）、軽度の血小板減少症により、リストセケチン誘発性血小板凝集の増加、および高等層多数の多重層の欠陥の欠如が示されました。、2b von Willebrand病（VWD）のすべての典型的な表現型の特徴。VWF遺伝子配列の分析により、CIS変異におけるヘテロ接合が明らかになりました：（1）c.2771g> aおよび（2）c.6532g> T置換は、それぞれエクソン21および37です。最初の突然変異は、D'D3ドメインの位置924にGLNを伴うARG残基の置換を引き起こします。2番目の突然変異により、ALAはD4ドメインの位置2178でSER置換を行います。患者の娘は同じ父親の突然変異を呈しませんでしたが、母親から遺伝したp.p1127S置換を引き起こすVWF遺伝子のエクソン25で、ヘテロ接合体多型C.3379c> t変異のみを示しました。cis vwf変異体rvwfwt/rvwf924q-2178のヘテロ接合体のin vitro発現は、ex vivo vwf所見を確認し、再現しました。分子モデリングは、これらのCIS変異がVWFモノマーの部分的に伸びたオープンコンフォメーションを安定化することを示しました。透過型電子顕微鏡検査と原子力顕微鏡検査顕微鏡検査型ヘテロ接合体組換え型RVWFWT/RVWF924Q-2178Sに伸びた立体構造を示し、静的条件下でも弦を形成します。したがって、CIS変異924Q/2178のヘテロ接合体は、VWF分子の立体構造遷移を促進し、VWFのA1ドメインに典型的な変異がないにもかかわらず、2B様VWD表現型を引き起こします。

We observed a 55-year-old Italian man who presented with mucosal and cutaneous bleeding. Results of his blood analysis showed low levels of von Willebrand factor (VWF) antigen and VWF activity (both VWF ristocetin cofactor and VWF collagen binding), mild thrombocytopenia, increased ristocetin-induced platelet aggregation, and a deficiency of high-molecular-weight multimers, all typical phenotypic hallmarks of type 2B von Willebrand disease (VWD). The analysis of the VWF gene sequence revealed heterozygous in cis mutations: (1) c.2771G>A and (2) c.6532G>T substitutions in the exons 21 and 37, respectively. The first mutation causes the substitution of an Arg residue with a Gln at position 924, in the D'D3 domain. The second mutation causes an Ala to Ser substitution at position 2178 in the D4 domain. The patient's daughter did not present the same fatherly mutations but showed only the heterozygous polymorphic c.3379C>T mutation in exon 25 of the VWF gene causing the p.P1127S substitution, inherited from her mother. The in vitro expression of the heterozygous in cis VWF mutant rVWFWT/rVWF924Q-2178S confirmed and recapitulated the ex vivo VWF findings. Molecular modeling showed that these in cis mutations stabilize a partially stretched and open conformation of the VWF monomer. Transmission electron microscopy and atomic force microscopy showed in the heterozygous recombinant form rVWFWT/rVWF924Q-2178S a stretched conformation, forming strings even under static conditions. Thus, the heterozygous in cis mutations 924Q/2178S promote conformational transitions in the VWF molecule, causing a type 2B-like VWD phenotype, despite the absence of typical mutations in the A1 domain of VWF.