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Methods in molecular biology (Clifton, N.J.)20200101Vol.2163issue()

好塩基球の活性化技術:外側の顆粒マトリックスの染色

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文献タイプ:
  • Journal Article
概要
Abstract

従来のフローサイトメトリーアレルギー診断の基礎は、好塩基性表面活性化および/または脱顆粒マーカーの発現の測定です。好塩基球は、表面FCRI結合IgE抗体を架橋する特定のアレルゲンと遭遇すると、定量化可能な生物活性メディエーターを分泌および放出するだけでなく、多色の流れの細胞測定によって検出されるさまざまなマーカー(CD63、CD203Cなど)の発現をアップレギュレートします。特定のモノクローナル抗体を使用します。ここでは、カチオン性蛍光アビジンプローブによる好塩基球顆粒マトリックスからのエクステリオ化アニオン性プロテオグリカンの染色に依存する新しい技術について説明します。

従来のフローサイトメトリーアレルギー診断の基礎は、好塩基性表面活性化および/または脱顆粒マーカーの発現の測定です。好塩基球は、表面FCRI結合IgE抗体を架橋する特定のアレルゲンと遭遇すると、定量化可能な生物活性メディエーターを分泌および放出するだけでなく、多色の流れの細胞測定によって検出されるさまざまなマーカー(CD63、CD203Cなど)の発現をアップレギュレートします。特定のモノクローナル抗体を使用します。ここでは、カチオン性蛍光アビジンプローブによる好塩基球顆粒マトリックスからのエクステリオ化アニオン性プロテオグリカンの染色に依存する新しい技術について説明します。

The basis of traditional flow cytometry allergy diagnosis is measurement of the expression of basophilic surface activation and/or degranulation markers. Basophils, upon encounter with a specific allergen that cross-links surface FcRI-bound IgE antibodies, not only secrete and release quantifiable bioactive mediators but also upregulate the expression of different markers (e.g., CD63, CD203c) which can be detected by multicolor flow cytometry using specific monoclonal antibodies. Here, we describe a novel technique that relies upon the staining of exteriorized anionic proteoglycans from a basophil granule matrix by cationic fluorescent avidin probes.

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