解剖学的に敏感な象牙質のマイクロサンプリングと人間の歯の年齢調整アプローチのガイド同位体シーケンス

目的：シーケンシャル象牙質サンプルの安定した同位体分析は、過去の個人の初期の生活史への洞察を明らかにするための潜在的に強力な方法です。しかし、象牙質の増殖成長構造は複雑であり、脱灰色の歯の半分または四分の一の水平セクションを適用する現在のアプローチは、複数の成長層を組み合わせたリスクを伴い、不要なセメントムまたは二次象牙質を含む場合があります。また、歯の​​大部分を破壊する必要があります。ここでは、損傷を軽減し、時間的解像度を増加させ、個人間の年齢調節の精度を向上させる、破壊的ではなく比較的単純なプロトコルを提示します。 材料と方法：薄いセクションからの小さな（直径1 mm）円筒形のプラグトランセクトのサンプリングと、象牙質領域の平均成長率に基づいた年齢調整スキームを含むプロトコルの概要を説明します。 結果と議論：提案されたプロトコルは、水平スライスよりも容易に適用可能であり、解剖学的に敏感です。マイクロサンプルは（長さと深さの両方で）小さくなるため、一時的な重複を最小限に抑え、成長パターンに違反する可能性のある方向を回避します。彼らは、二次および三次象牙質またはセメント質を堆積させることができる領域を完全に回避します。解剖学的歯ゾーンの成長率を使用することにより、年齢の調整が改善されます。 結論：この方法は、破壊を最小限に抑え、より細かい時間分解能を可能にし、データの比較を促進します。蛍光イメージングベースまたは他の象牙質コラーゲン保存の事前スクリーニング方法と容易に組み合わせることができます。

OBJECTIVES: Stable isotope analysis of sequential dentine samples is a potentially powerful method to reveal insights into early life-histories of individuals in the past. Dentine incremental growth structures are complex, however, and current approaches that apply horizontal sectioning of demineralized tooth halves or quarters risk combining multiple growth layers and may include unwanted cementum or secondary dentine. They also require destruction of large parts of a tooth. Here, we present a less destructive and relatively straightforward protocol that reduces damage, increases temporal resolution, and improves the accuracy of age-alignment between individuals. MATERIAL AND METHODS: We outline a protocol that includes the sampling of small (1 mm diameter) cylindrical plug transects from a thin section, along with an age-alignment scheme predicated on average growth rates for dentine areas. RESULTS AND DISCUSSION: The proposed protocol is readily applicable and more anatomically sensitive than horizontal slicing. Micro-samples are smaller (in both length and depth), hence minimizing temporal overlap and avoid directions that may contravene growth pattern. They completely avoid areas where secondary and tertiary dentine or cementum can be deposited. Age-alignment is improved by using growth ratios of anatomical tooth zones. CONCLUSION: This method minimizes destruction, enables finer temporal resolution and facilitates data comparison. It can be readily combined with fluorescence imaging-based or other pre-screening methods of dentine collagen preservation.